方法名稱：

乙酰螺旋霉素原料藥—乙酰螺旋霉素的測定—抗生素微生物檢定法

應(yīng)用范圍：

該方法采用抗生素微生物檢定法測定乙酰螺旋霉素原料藥中乙酰螺旋霉素的含量。

該方法適用于乙酰螺旋霉素原料藥。

方法原理：

供試品經(jīng)乙醇溶解后，加滅菌水制成每1mL約含1000單位的溶液，按抗生素微生物檢定法測定。

試劑：

1. 乙醇

2. 滅菌水

3. 枯草芽孢桿菌懸液

4. 培養(yǎng)基Ⅱ

儀器設(shè)備：

試樣制備：

1.枯草芽孢桿菌懸液

取枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63 501]的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于盛有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在35~37培養(yǎng)7日，用革蘭染色法涂片鏡檢，應(yīng)有芽孢85%以上。用滅菌水將芽孢洗下，在65℃加熱30分鐘，備用。

2.培養(yǎng)基Ⅱ

混合胨6g，牛肉浸出粉1.5g，酵母浸出粉6g及水1000mL，調(diào)節(jié)pH使比最終pH略高0.2~0.4，加入瓊脂15~20g，加熱溶化后濾過，加葡萄糖1g溶解后，搖勻，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為8.0~8.2，在115℃滅菌30分鐘。

3.供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加乙醇使溶解（每5mg加乙醇2mL），加滅菌水制成每1mL約含1000單位的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求

操作步驟：

取供試品溶液照抗生素微生物檢定法測定。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.6。