（1）取本品粉末1g，加甲醇10ml，在水浴上回流10min，濾過。濾液稍濃縮后，取1ml，加濃鹽酸4-5滴及鎂粉（或鋅粉）少許，在沸水浴中加熱3min，溶液呈粉紅色。（檢查黃酮類）（2）薄層色譜取本品粉末約1g，酸性乙醇回流提取，濾過。濾液回收乙醇，殘渣加2%鹽酸約5ml溶解，用氨水堿化，氯訪提取3次，合并提取液，用無水硫酸鈉脫水，濾過。濾液濃縮至1ml，為樣品液。以普羅托品、紫堇靈為對照品。點樣于堿性硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚-乙醇-氨水（18：2：1：0.05）展開10cm。取出，晾干，噴以改良碘化秘鉀試劑，供試品色譜與對照品色譜在相應(yīng)位置顯相同橘紅色斑點。（檢查生物堿類）

方法名稱： 苦地?。陷漓`的測定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定苦地丁中紫堇靈的含量。

本方法適用于罌粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。

方法原理： 本品加甲醇超聲處理，放冷，補重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長289nm處檢測紫堇靈的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7）：取磷酸二氫鉀1.58g和磷酸氫二鉀0.76g，加水1000mL溶解，混勻，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.7。

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按紫堇靈峰計算應(yīng)不低于6000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7）=70 30

2.2檢測波長：289nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過三號篩）0.5g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取紫堇靈對照品適量，加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩）約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長289nm處測定紫堇靈（C21H21O5N）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p139。