【概述】

　　霍亂（cholera）是由霍亂弧菌所致的烈性腸道傳染病，臨床表現(xiàn)輕重不一，典型病例病情嚴重，有劇烈吐瀉、脫水、微循環(huán)衰竭、代謝性酸中毒和急性腎功能衰竭等。治療不及時常易死亡，屬甲類傳染病。過去將古典生物型（classical biotype）霍亂弧菌所致的感染稱為霍亂，由愛爾托生物型（EI Tor biotype）所致者稱副霍亂。鑒于霍亂弧菌的兩個生物型在形態(tài)和血清學方面幾乎一樣，兩種弧菌感染的臨床表現(xiàn)和防治措施基本相同，因此，分別命名為霍亂和副霍亂并無必要，而統(tǒng)稱為霍亂。世界第五、六次大流行與古典生物型有關，第七次則由印尼地方流行的愛爾托生物型所致，延續(xù)至今未止。而1992年于印度及孟加拉等地流行的霍亂，已證實是新血清型所致，該菌定名為0139.現(xiàn)已波及巴基斯坦、斯里蘭卡、泰國、尼泊爾、我國香港及歐美等地，似有形成第八次流行之勢。

　　【診斷】

　?。ㄒ唬┰\斷標準　具有下列之一者，可診斷為霍亂。

　　1.有腹瀉癥狀，糞便培養(yǎng)霍亂弧菌陽性。

　　2.霍亂流行期間，在疫區(qū)內(nèi)有典型的霍亂腹瀉和嘔吐癥狀，迅速出現(xiàn)嚴重脫水，循環(huán)衰竭和肌肉痙攣者。雖然糞便培養(yǎng)未發(fā)現(xiàn)霍亂弧菌，但并無奉承舞廳中查者。如有條件可作雙份血清凝集素試驗，滴度4倍上升者可診斷。

　　3.疫原檢索中發(fā)現(xiàn)糞便培養(yǎng)陽性前5天內(nèi)有腹瀉癥狀者，可診斷為輕型霍亂。

　?。ǘ┮伤圃\斷　具有以下之一者。

　　1.具有典型霍亂癥狀的首發(fā)病例，病原學檢查尚未肯定前。

　　2.霍亂流行期間與霍亂患者有明確接觸史，并發(fā)生瀉吐癥狀，而無其他原因可查者。

　　疑似病人應進行隔離、消毒，作疑似霍亂的疫情報告，并每日作大便培養(yǎng)，若連續(xù)二次大便培養(yǎng)陰性，可作否定診斷，并作疫情訂正報告。

　　典型霍亂的臨床表現(xiàn)也可由非O-I群弧菌和產(chǎn)生腸毒素的大腸桿菌（ETEC）引起。前者多數(shù)病人的腹瀉伴劇烈腹痛和發(fā)熱；1/4的病人糞便呈血性。大腸桿菌引起的腹瀉一般病程較短。兩者與霍亂的鑒別有賴于病原學檢查?；魜y應與各種細菌性食物中毒相鑒別，如金黃色葡萄球菌、變形桿菌、蠟樣芽胞桿菌及副溶血如金黃色葡萄球菌、變形桿菌、蠟樣芽胞桿菌及副溶血弧菌引起者，各種食物中毒起病急，同食者常集體發(fā)病，常先吐后瀉，排便前有陣發(fā)性腹痛，糞便常為黃色水樣，偶帶膿血。部分的糞便呈洗肉水樣或痢疾樣，則需與細菌性痢疾鑒別，后者多伴腹痛和里急后重，糞便量少，呈膿血樣。急性砷中毒以急性胃腸炎為主要表現(xiàn)，糞便為黃色或灰白水樣，常帶血，嚴重者尿量減少，甚至尿閉及循環(huán)衰竭等。檢查糞便或嘔吐物砷含量可明確診斷。

　　【治療措施】

　　包括嚴格隔離、補液、抗菌及對癥等。

　?。ㄒ唬└綦x　確診及疑診病例應分別隔離，徹底消毒排泄物。病人癥狀消除后，糞便連續(xù)兩次培養(yǎng)陰性方可解除隔離。

　　（二）補液

　　1.靜脈補液　通常選擇與患者所失去的電解質(zhì)濃度相似的541液，其每升含NaCl5g，NaHCO34g，KCl 1g，為防低血糖，常另加50%葡萄糖20ml，配制時可用0.9%NaCl 500ml，1.4%NaHCO3300ML，10%KCl 10ml，10%葡萄糖140ml比例配制。

　　各種液體的電解質(zhì)含量以及患者糞便中所含電解質(zhì)的量見表11-26.

表11-26　補液中電解質(zhì)含量及其與糞便、血漿含量對比（濃度mmol/L）

　　*碳酸氫鹽可用醋酸鹽代替（比較穩(wěn)定）

　　靜脈輸液的量與速度　依失水程度而定，24h的補液量依病情輕重而定，輕度失水者應以口服補液為主，若有嘔吐無法口服者給予靜脈補液3000～4000/天，初1～2小時宜快速，5～10ml/分鐘；中度失水補液4000～8000ml/天，最初1～2小時快速滴入，至血壓、脈搏復常后，乃減至5～10ml/分鐘；重度失水需每日補8000～12000ml，以二條靜脈管道，先以40～80ml/分鐘，以后減至20～30ml/分鐘直至休克糾正后減速，直至脫水糾正。

　　兒童患者的糞便含鈉量較低而含鉀量較高，失水較嚴重，病情發(fā)展較快，易發(fā)生低血糖昏迷、腦水腫和低血鉀癥，故應及時糾正失水和補充鉀鹽。輕者24小時補液量為100～150ml/kg，中、重型患兒24h靜脈補液各為150～200ml/kg和200～250ml/kg，可用541液。嬰幼兒可適當增加。最初15min內(nèi)4歲以上兒童每分鐘補液20～30ml，嬰幼兒10ml/分鐘。根據(jù)血漿比重計算，比重每升高0.001嬰幼兒的補液量為每kg體重10ml，其總量的40%于30分鐘內(nèi)輸入，余量于3～4小時輸完。［醫(yī)學 教育網(wǎng) 搜 集整理］

　　堿性藥物的補充使代謝性酸中毒迅速得到糾正也是治療成功的重要條件。碳酸氫鈉能迅速糾正酸中毒，乳酸鹽和醋酸鹽則于1～2小時內(nèi)使酸中毒徐緩得到糾正。鉀鹽也需及時適當補充，可由靜脈或口服給予。每1000ml靜脈補液中含10～15mEq氯化鉀，口服方中每1000ml水中含有醋酸鉀、枸櫞酸鉀和碳酸氫鉀各100g，成人每日3次，每次10ml，兒童適當減量。

　　2.口服補液　霍亂病人口服氯化鈉溶液后不能吸收，但鉀鹽和碳酸鹽可以吸收，對葡萄糖的吸收能力也無改變，且葡萄糖可促使氯化鈉和水分的吸收。因此，對輕、中型病人可予口服補液，對重癥病人先予以靜脈補液，待休克糾正、情況改善后，再改為口服補液?？诜a液配方較多，皆大同小異。補液加溫后口服或經(jīng)鼻飼管注入。在第一個6小時，成人口服液量為700ml/小時，兒童每小時15～25ml/kg，腹瀉嚴重時入液量可適當增加。以后每6小時出液量的1.5倍計算。嘔吐并非口服補液的禁忌，但嘔吐物量應計算在液量中。碳酸氫鹽可為檸檬酸鹽代替，后者較為穩(wěn)定，不易潮解，也有良好糾酸作用，且能促進鈉離子在小腸的吸收。蔗糖代替葡萄糖也可獲得滿意的療效，但蔗糖用量為葡萄糖的1倍。甘氨酸也能促進水和電解質(zhì)的吸收，可加入口服補液中，每1000ml溶液含110mmol甘氨酸。經(jīng)甘氨酸治療的患者糞便量、腹瀉天數(shù)及口服液用量均顯著減少。

　?。ㄈ┛咕委煛】咕幬锟刂撇≡罂煽s短病程，減少腹瀉次數(shù)。但僅作為液體療法的輔助治療。近年來已發(fā)現(xiàn)四環(huán)素的耐藥菌株，但對多西環(huán)素（doxycycline）仍敏感。目前常用藥物：復方新諾明，每片含甲氧芐啶（TMP）80mg，磺胺甲噁唑（SMZ）40mg，成人每次2片，每天2次。小兒30mg/kg，分2次口服。多西環(huán)素成人每次200mg，每天2次，小兒每日6mg/kg分2次口服。諾佛沙星（norfloxacin）成人每次200mg，每日3次或環(huán)丙沙星（ciprofloxacin）成人每次250～500mg，每日2次口服。以上藥物任選一種，連服3日。不能口服者可應用氨芐西林肌肉或靜脈注射。

　?。ㄋ模ΠY治療

　　1.糾正酸中毒　重型患者在輸注541溶液的基礎上尚需根據(jù)CO2結合力情況，應用5%碳酸氫鈉酌情糾酸。

　　2.糾正低血鉀　補液過程中出現(xiàn)低血鉀者應靜脈滴入氯化鉀，濃度一般不宜超過0.3%.輕度低血鉀者可口服補鉀。

　　3.糾正休克和心力衰竭　少數(shù)患者經(jīng)補液后血容量基本恢復，皮膚粘膜脫水表現(xiàn)已逐漸消失，但血壓未復常者，可用地塞米松20～40mg或氫化可的松100～300mg，靜脈滴注，并可加用血管活性藥物多巴胺和阿拉明靜脈滴注。如出現(xiàn)心衰、肺水腫，則應暫?；驕p慢輸液速度，應用西地蘭0.4mg或毒毛旋花子苷K0.25mg加葡萄糖20ml，緩慢靜脈注射。必要時應用速尿20～40mg靜脈注射，亦可應用度冷丁50mg肌注鎮(zhèn)靜。

　　4.抗腸毒素治療　目前認為氯丙嗪對小腸上皮細胞的腺苷環(huán)化酶有抑制作用，臨床應用能減輕腹瀉，可應用1～2mg/kg口服或肌注。黃連素亦有抑制腸毒素和具有抗菌作用，成人每次0.3g，每日3次口服。小兒50mg/kg，分3次口服。

　　【病原學】

　　1.形態(tài)染色　霍亂弧菌革蘭染色陰性，菌體長1.5～2.0μm，寬0.3～0.4μm，彎曲如逗點狀，有一根極端鞭毛，其長度為菌體的4～5倍。

　　該菌運動活潑，在暗視野懸液中可見穿梭運動，糞便可用于直接涂片檢查。

　　2.培養(yǎng)特性　霍亂弧菌在堿性（pH8.8～9.0）肉湯或蛋白胨水中繁殖迅速，表面形成透明菌膜?；【跔I養(yǎng)瓊脂或肉浸膏瓊脂培養(yǎng)過夜后，其菌落大，半透明，帶灰色。在選擇性培養(yǎng)基中弧菌生長旺盛，常用者有膽鹽瓊脂、硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖培養(yǎng)基（TCBS）、亞磅酸鹽瓊脂等。

　　3.生化反應　01群霍亂弧菌和非典型01群霍亂弧菌均能發(fā)酵蔗糖和甘露糖，不發(fā)酵阿拉伯糖。非01群霍亂弧菌對蔗糖和甘露糖發(fā)酵情況各不相同。此外埃爾托生物型能分解葡萄糖產(chǎn)生乙酰甲基甲醇（即VP試驗）。0139型能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和甘露糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵肌醇和阿拉伯糖。

　　4.霍亂弧菌經(jīng)干燥2h或加熱55℃10min即可死亡，煮沸立即死亡?；【佑|1∶2000～3000升汞或1∶500000高猛酸鉀，數(shù)分鐘即被殺滅，在0.1%漂白粉中10分鐘即死亡?；魜y弧菌在正常胃酸中能生存4分鐘，在未經(jīng)處理的糞便中存活數(shù)天。在pH7.6～8.8的淺水井中，古典霍亂弧菌平均存活7.5天，愛爾托霍亂弧菌為19.3天。愛爾托弧菌在海水和深水井中存活10～13天。氯化鈉濃度高于4%或蔗糖濃度在5%以上的食物、香料、醋、酒等，均不利于弧菌的生存?；魜y弧菌在冰箱內(nèi)的牛奶、鮮肉和魚蝦水產(chǎn)品存活時間分別為2～4周、1周和1～3周；在室溫存放的新鮮蔬菜存活1～5天?；魜y弧菌在砧板和布上可存活相當長時間，在玻璃、瓷器、塑料和金屬上存活時間不超過2天。

　　5.抗原結構　霍亂弧菌有耐熱的菌體（O）抗原和不耐熱的鞭毛（H）抗原。H抗原為霍亂弧菌屬所共有；O抗原有群特異性和型特異性兩種抗原，是霍亂弧菌分群和分型的基礎。群的特異性抗原可達100余種。

　　6.分類　WHO腹瀉控制中心將霍亂弧菌分為三群。

　?、?1群霍亂弧菌：包括古典生物型霍亂弧菌（vibrio cholerde）和埃爾托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的特異抗原有A、B、C三種，其中A抗原為01群所共有，A抗原與其他B與C抗原結合則可分為三型，即：原型——AC（稻葉，Inaba）、異型——AB（小川，Ogawa）和中間型——ABC（彥島，Hikojima）。

　?、品?1群霍亂弧菌：本群弧菌鞭毛抗原同01群，而菌體（0）抗原則不同，不被01群霍亂弧菌多價血清所凝集，依O抗原之異，本群可分為137個血清型。以往認為本群僅引起散發(fā)的胃腸炎性腹瀉，一般此類弧菌感染不作霍亂處理，但1992年在印度及孟加拉等地發(fā)生霍亂暴發(fā)流行，后證實流行菌不被01群和137年非01群霍亂弧菌診斷血清所凝集。乃定為0139霍亂弧菌，并認定為真正的霍亂弧菌。

　　⑶不典型01群霍亂弧菌：可被多價01群血清所凝集，但該群菌不產(chǎn)生腸毒素，因此無此病性。

　　霍亂弧菌能產(chǎn)生腸毒素、神經(jīng)氨酸酶、血凝素、菌體裂解后能釋放出內(nèi)毒素。其中霍亂腸毒素（CT）在古典型、ET-Tor型和0139型之間很難區(qū)別。

　　【發(fā)病機理】

　　人體存在非特異性免疫，以抵擋霍亂弧菌的侵入。胃酸在其中起主要作用，胃大部切除后、大量飲水、大量進食使胃酸稀釋均降低對霍亂弧菌的抵抗。但正常入食入霍亂弧菌量超過108-9，均可發(fā)病。

　　人體的其他屏障如腸道動力、腸腔粘液、酶及膽鹽等，霍亂弧菌卻可以適應?；魜y弧菌通過鞭毛活動、粘蛋白溶解酶、粘附素以及細菌的化學趨化作用等，使弧菌能成功地粘附于腸粘膜上皮細胞，但不侵入細胞，繼續(xù)繁殖，繼而腸毒素起重要作用。

　　霍亂腸毒素有A、B兩個亞單位，具有毒素活性的亞單位A又可分為由二硫化物聯(lián)結的A1和A2兩個多肽，分子量分別為23～24kD和5～6kD.亞單位B有5個部分，每個分子量為11.6kD，可各自與腸粘膜上皮細胞刷緣細胞膜的受體（Gm1神經(jīng)節(jié)苷脂）結合。亞單位B與腸粘膜細胞結合后，亞單位A與毒素整個分子脫離，并移行至細胞膜內(nèi)側，其A1部分被釋放至胞液內(nèi)，激活腺苷環(huán)酶，后者使三磷酸腺苷變成環(huán)磷酸腺苷。大量的環(huán)磷酸腺苷積聚在粘膜細胞內(nèi)，發(fā)揮第二信使作用，刺激隱窩細胞分泌氯離子并可能分泌碳酸氫根離子，同時抑制絨毛細胞對氯和鈉離子的正常吸收。由于腸粘膜分泌增強，回收減少，因而大量腸液聚集在腸腔內(nèi)，形成本病特征性的劇烈水樣腹瀉。

　　霍亂弧菌的內(nèi)毒素來自弧菌細胞壁，耐熱，具有弧菌O抗原的特異性，與霍亂發(fā)病關系不大?；【a(chǎn)生的酶（如粘蛋白酶）、代謝產(chǎn)物或其他毒素（如血管滲透因子、溶血素等）對人體有一定損害作用。

　　劇烈腹瀉和嘔吐，導致水和電解質(zhì)大量丟失，迅速形成嚴重脫水，因而出現(xiàn)微循環(huán)衰竭。鉀、鈉、鈣及氯化物的喪失，可發(fā)生肌肉痙攣、低鈉、低鉀和低鈣血癥等。由于膽汁分泌減少，腸液中有大量水、電解質(zhì)和粘液，所以吐瀉物呈米泔水樣。碳酸氯鹽的丟失，形成代謝性酸中毒。由于循環(huán)衰竭造成的腎缺血、低鉀及毒素對腎臟的直接作用，可引起腎功能減退或衰竭。

　　【病理改變】

　　病理解剖可見病人小腸活檢僅顯示輕微炎癥。絨毛細胞有變形的微絨毛或無微絨毛相伴的大偽足樣胞質(zhì)突起，自尖端細胞表面伸入腸腔。隱窩細胞也有偽足樣突起伸到隱窩腔內(nèi)。上皮細胞有線粒體腫脹和嵴垢消失、高爾基體泡囊數(shù)增加及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的擴張和囊泡形成。死亡病人的主要病理變化為嚴重脫水現(xiàn)象：尸僵出現(xiàn)早，皮膚干而發(fā)紺，皮下組織及肌肉干癟。內(nèi)臟漿膜無光澤，腸內(nèi)充滿米泔水樣液體，膽囊內(nèi)充滿粘稠膽汁。心、肝、脾等臟器均見縮小。腎小球及間質(zhì)的毛細管擴張，腎小管濁腫、變性及壞死。其他臟器也有出血、變性等變化。

　　【流行病學】

　　病人與帶菌者是霍亂的傳染源。典型病人的吐瀉物含菌量甚多，每ml糞便可含107～109弧菌，這對疾病傳播起重要作用。輕型病人易被忽略，健康帶菌者不易檢出，兩者皆為危險傳染源。潛伏期帶菌者尚無吐瀉，恢復期帶菌者排菌時間一般不長，兩者作為傳染源的意義居次要地位。海洋甲殼類生物表面可粘附愛爾托弧菌，后者分泌甲殼酶，分解甲殼作為營養(yǎng)而長期存活。當進食污染海產(chǎn)品后可形成霍亂流行。實驗觀察，愛爾托弧菌為人工飼養(yǎng)的泥鰍、鱔魚吞食后，可在后者體內(nèi)生長繁殖，然后排入水中；因此泥鰍、鱔魚可成為弧菌的保存宿主，散播病原菌，造成霍亂流行。

　　本病主要借水傳播，污染的食品和手以及蒼蠅等，對傳播疾病也起一定作用。

　　男女老幼均對本病易感。在新感染區(qū)，成人比兒童易受感染；在地方流行區(qū)，兒童發(fā)病率較成人為高，后者對感染的抵抗力隨著對霍亂弧菌抗體滴度的升高而增加。病后丙次發(fā)生嚴重感染者少見。實驗感染霍亂弧菌的志愿者，對第二次感染的具高度抵抗力，其時間至少可維持3年。古典霍亂弧菌初次感染的免疫力能（100%保護力）較埃爾托弧菌者（90%保護力）為強?；魜y患者雖然對新感染的保護免疫可達數(shù)年，但對霍亂毒素和細菌的腸抗體僅維持一致數(shù)月。

　　【臨床表現(xiàn)】

　　潛伏期1～3天，短者數(shù)小時，長者7天，大多急起，少數(shù)在發(fā)病前1～2天有頭昏、疲勞、腹脹、輕度腹瀉等前驅(qū)癥狀。古典生物型與0139型霍亂弧菌引起的疾病，癥狀較嚴重，埃爾托型所致者，輕型較多，無癥狀者也多。

　?。ㄒ唬┑湫筒±〔〕谭譃?期。

　　1.瀉吐期　絕大多數(shù)病人以急劇腹瀉、嘔吐開始。腹瀉為無痛性，少數(shù)病人可因腹直肌痙攣而引起腹痛不伴里急后重。大便開始為泥漿樣或水樣，尚有糞質(zhì)；迅速成為米泔水樣或無色透明水樣，無糞臭，微有淡甜或魚腥味，含大量片狀粘液，少數(shù)重癥病人偶有出血，則大便呈洗肉水樣，出血多可呈柏油樣，以埃爾托型所致者為多。大便量多，每次可超過1000ml，每日十余次，甚至難以計數(shù)。嘔吐多在腹瀉后出現(xiàn)，常為噴射性和連續(xù)性，嘔吐物先為胃內(nèi)容物，以后為清水樣。嚴重者可為“米泔水”樣，輕者可無嘔吐。本期持續(xù)數(shù)小時至1～2天。

　　2.脫水期　由于頻繁的腹瀉和嘔吐，大量水和電解質(zhì)喪失，病人迅速出現(xiàn)脫水和微循環(huán)衰竭。病人神志淡漠、表情呆滯或煩躁不安，兒童可有昏迷。口渴、志嘶啞、呼吸增快、耳鳴、眼球下陷、面頰深凹、口唇干燥、皮膚涼、彈性消失、手指皺癟等。肌肉痙攣多見于腓腸肌和腹直肌。腹舟狀，有柔韌感。脈細速或不能觸及，血壓低。體表體溫下降，成人肛溫正常，兒童肛溫多升高。此期一般為數(shù)小時至2～3天。

　　3.恢復期　病人脫水得到及時糾正后，多數(shù)癥狀消失而恢復正常，腹瀉次數(shù)減少，甚至停止。聲音恢復、皮膚濕潤，尿量增加。約1/3病人有反應性發(fā)熱，極少數(shù)病人，尤其是兒童可有高熱。

　?。ǘ┡R床類型　根據(jù)臨床表現(xiàn)，霍亂可分為五型。

　　1.無癥狀型　感染后無何癥狀，僅呈排菌狀態(tài)，稱接觸或健康帶菌者，排菌期一般為5～10天，個別人可遷延至數(shù)月或數(shù)年，成為慢性帶菌者。

　　2.輕型　病人微感不適，每日腹瀉數(shù)次，大便稀薄，一般無嘔吐無脫水表現(xiàn)，血壓、脈搏均正常，血漿比重在1.026～1.030間，尿量無明顯減少。

　　3.中型　吐瀉次數(shù)較多，每日達10～20次。大便呈米泔水樣，有一定程度的脫水。血壓降低（收縮壓為9.31～12kPa）（90～70mmHg），脈搏細速，血漿比重為1.031～1.040，24h尿量在500ml以下。

　　4.重型　吐瀉頻繁，脫水嚴重，血壓低，甚至不能測出，脈速弱常不能觸及，血漿比重＞1.041，尿極少或無尿。

　　5.暴發(fā)型　亦稱干性霍亂，甚罕見。起病急驟，不待瀉吐出現(xiàn)，即因循環(huán)衰竭而死亡。

　　【并發(fā)癥】

　　（一）腎功能衰竭　由于休克得不到及時糾正和低血鉀所引起，表現(xiàn)為尿量減少和氮質(zhì)血癥，嚴重者出現(xiàn)尿閉，可因尿毒癥而死亡。

　?。ǘ┘毙苑嗡[　代謝性酸中毒可導致肺循環(huán)高壓，后者又因補充大量不含堿的鹽水而加重。

　　（三）其他　低鉀綜合征、心律不齊及流產(chǎn)等。

　　【輔助檢查】

　?。ㄒ唬┭簷z查　紅細胞和血紅蛋白增高，白細胞計數(shù)10～20×109/L（1萬～2萬/mm3）或更高，中性粒細胞及大單核細胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽降低，血pH下降，尿素氮增加。治療前由于細胞內(nèi)鉀離子外移，血清鉀可在正常范圍內(nèi)，當酸中毒糾正后，鉀離子移入細胞內(nèi)而出現(xiàn)低鉀血癥。

　?。ǘ┠驒z查　少數(shù)病人尿中可有蛋白、紅白細胞及管型。

　?。ㄈ┎≡鷻z查

　　1.常規(guī)鏡檢　可見粘液和少許紅、白細胞。

　　2.涂片染色　取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢，可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。

　　3.懸滴檢查　將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢，可見運動活潑呈穿梭狀的弧菌。

　　4.制動試驗　取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時左右的表層生長物，先作暗視野顯微鏡檢，觀察動力。如有穿梭樣運動物時，則加入01群多價血清一滴，若是01群霍亂弧菌，由于抗原抗體作用，則凝集成塊，弧菌運動即停止。如加01群血清后，不能制止運動，應再用0139血清重作試驗。

　　5.增菌培養(yǎng)　所有懷疑霍亂患者糞便，除作顯微鏡檢外，均應作增菌培養(yǎng)。糞便留取應在使用抗菌藥物之前，且應盡快送到實驗室作培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水，36～37℃培養(yǎng)6～8小時后表面能形成菌膜。此時應進一步作分離培養(yǎng)，并進行動力觀察和制動試驗，這將有助于提高檢出率和早期診斷。

　　6.分離培養(yǎng)　常用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強選擇性培養(yǎng)基，36～37℃培養(yǎng)8～10小時霍亂弧菌即可長成小菌落。后者則需培養(yǎng)10～20小時。選擇可疑或典型菌落，應用霍亂弧菌“0”抗原的抗血清作玻片凝集試驗，若陽性即可出報告。近年來國外亦有應用霍亂毒素基因的DNA探針，作菌落雜交，可迅速鑒定出產(chǎn)毒01群霍亂弧菌。

　　7.PCR檢測　新近國外應用PCR技術來快速診斷霍亂。其中通過識別PCR產(chǎn)物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因（TcpA）來區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時內(nèi)可獲結果，據(jù)稱能檢出每ml堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。

　　8.鑒別試驗　古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑒別，見表11-25.

表11-25　古典、埃爾托和0139型霍亂弧菌鑒別

　　【預防】

　?。ㄒ唬┛刂苽魅驹础〖皶r檢出病人，盡早予以隔離治療。對密切接觸者應嚴密檢疫，進行糞便檢查和藥物治療，糞便培養(yǎng)應每日一次，連續(xù)2天，每一次糞檢后給予服藥可減少帶菌者，一般應用多西環(huán)素200mg頓服，次日口服100mg.兒童每日6mg/kg，連服2日。亦可應用諾佛沙星，每次200mg，每日3次，連服2日。同時應作好國境衛(wèi)生檢疫和國內(nèi)交通檢疫，一旦發(fā)現(xiàn)病人或疑似患者，應立即進行隔離治療，并對交通工具進行徹底消毒。

　?。ǘ┣袛鄠鞑ネ緩郊訌婏嬎竞褪称饭芾?，對病人和帶菌者的排泄物進行徹底消毒。此外應消滅蒼蠅等傳播媒介。

　　（三）提高人群免疫力　以往應用全菌死菌苗或并用霍亂腸毒素的類毒素疫苗免疫人群，由于保護率低，保護時間短，且不能防止隱性感染和帶菌者，因而已不提倡應用。目前國外應用基因工程技術制成并試用的有多種菌苗，現(xiàn)仍在擴大試用，其中包括：

　　1.B亞單位-全菌體菌苗（BS-WC）這是由滅活的霍亂弧菌全菌體細胞（WC）和純化的霍亂腸毒素B亞單位（BS）組成的菌苗。其中WC細胞壁含有脂多糖（LSP）和霍亂毒素協(xié)同菌毛（TCP）等抗原，能誘導機體產(chǎn)生抗菌抗體，從而抑制霍亂弧菌在腸道定居；而BS產(chǎn)生的抗毒抗體，則能中和CT的B亞單位，使霍亂腸毒素不能與腸粘膜受體結合，而無從發(fā)揮腸毒素作用。此菌苗保護率為65%～85%左右，對古典生物型霍亂弧菌的預防作用優(yōu)于埃爾托生物型霍亂弧菌。［醫(yī)學教 育網(wǎng) 搜集整理］

　　2.減毒口服活菌苗CVD103-HgR這是應用DNA重組技術將除去94%的CtxA基因，重組于古典生物型霍亂弧菌的569B株中，獲得減毒株CVD103，然后導入一個抗汞（Hg）的編碼基因進入HlyA的染色體位點，成為CVD103-HgR減毒株。此菌苗能明顯對抗01群古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌的感染。Taket等報告，口服3～5×10⁸單一劑量CVD103-HgR菌后，志愿者中獲得100%的保護作用。一般認為保護作用至少持續(xù)6個月。但動物實驗表明此菌苗對O₁₃₉型霍亂弧菌無保護作用。