免疫組化技術(shù)切片方法-檢驗(yàn)士

應(yīng)用于光鏡的免疫組織化學(xué)染色的切片厚度一般要求5μm左右，神經(jīng)組織的研究要求切片厚度在20-100μm，有利于追蹤神經(jīng)纖維的走行。

1.冰凍切片：是免疫組織化學(xué)染色中最常用的一種切片方法。其最突出的優(yōu)點(diǎn)是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性，尤其是細(xì)胞表面抗原更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。

冰凍時(shí)，組織中水分易形成冰晶，往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時(shí)，影響較小，冰晶小而多時(shí)，對(duì)組織結(jié)構(gòu)損害較大，在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長(zhǎng)速率成正比，而與成核率（形成速率）成反比，即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小，對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此，應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開始時(shí)，冰晶成核率較慢，醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理以后逐漸增加，其臨界溫度為-33℃，從-30℃降至-43℃之間，成核率急劇增加達(dá)1018，然后再減慢?；谏鲜隼碚摽刹扇∫韵麓胧p少冰晶的形成。

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