利用各種化學(xué)物質(zhì)所具有的發(fā)射、吸收或散射光譜譜系的特征，來(lái)確定其性質(zhì)、結(jié)構(gòu)或含量的技術(shù)，稱(chēng)為光譜分析技術(shù)。

　　分類(lèi)：光譜分析技術(shù)分為發(fā)射光譜分析（熒光分析法和火焰光度法）、吸收光譜分析（可見(jiàn)及紫外光分光光度法、原子吸收分光光度法）和散射光譜分析（比濁法）。

　　（一）可見(jiàn)及紫外分光光度法

　　1.Beer定律：A=k·b·c

　　k一吸光系數(shù)

　　b一光徑，單位：cm.

　　c一溶液濃度，單位：g／L

　　2.摩爾吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當(dāng)c=1mol／L，b=1cm時(shí)，則常數(shù)k可用ε表示。

　　3.比吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當(dāng)c為百分濃度（w／v），b為cm時(shí)，則常數(shù)k可用E%表示，稱(chēng)為比吸光系數(shù)或百分吸光系數(shù)。

　　（二）原子吸收分光光度法

　　原子吸收分光光度法是基于元素所產(chǎn)生的原子蒸氣中待測(cè)元素的基態(tài)原子，對(duì)所發(fā)射的特征譜線的吸收作用進(jìn)行定量分析的一種技術(shù)，常用的定量方法有：

　　1.標(biāo)準(zhǔn)曲線法：將一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液按照一定操作過(guò)程分別進(jìn)行測(cè)定，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同條件下處理待測(cè)物質(zhì)并測(cè)定其吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出對(duì)應(yīng)的濃度。由于影響因素較多，每次實(shí)驗(yàn)都要重新制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　2.標(biāo)準(zhǔn)加入法：把待測(cè)樣本分成體積相同的若干份，分別加入不同量的標(biāo)準(zhǔn)品，然后測(cè)定各溶液的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品加入量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用直線外推法使工作曲線延長(zhǎng)交橫軸，找出組分的對(duì)應(yīng)濃度。本法的優(yōu)點(diǎn)是能夠更好地消除樣品基質(zhì)效應(yīng)的影響。

　　3.內(nèi)標(biāo)法：在系列標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣品中加入一定量樣本中不存在的元素（內(nèi)標(biāo)元素），分別進(jìn)行測(cè)定。以標(biāo)準(zhǔn)品與內(nèi)標(biāo)元素的比值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)未知樣品與內(nèi)標(biāo)元素的比值依曲線計(jì)算出未知樣品的濃度。本法要求內(nèi)標(biāo)元素應(yīng)與待測(cè)元素有相近的物理和化學(xué)性質(zhì)。只適用于雙通道型原子吸收分光光度計(jì)。

　　（三）熒光分析法

　　利用熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析的方法，稱(chēng)為熒光法。在熒光分析中，待測(cè)物質(zhì)分子成為激發(fā)態(tài)時(shí)所吸收的光醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理稱(chēng)為激發(fā)光，處于激發(fā)態(tài)的分子回到基態(tài)時(shí)所產(chǎn)生的熒光稱(chēng)為發(fā)射光。熒光分析法測(cè)定的是受光激發(fā)后所發(fā)射的熒光強(qiáng)弱。

　　（四）火焰光度法

　　火焰光度法是利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時(shí)發(fā)射的光譜強(qiáng)度進(jìn)行含量分析的方法。樣品中待測(cè)元素激發(fā)態(tài)原子的發(fā)射光強(qiáng)度I與該元素濃度C呈正比關(guān)系，即I=aC，式中a為常數(shù)，與樣品組成、蒸發(fā)和激發(fā)過(guò)程有關(guān)。

　　火焰光度法通常采用的定量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、標(biāo)準(zhǔn)加入法和內(nèi)標(biāo)法。

　　（五）透射和散射光譜分析法

　　主要測(cè)定光線通過(guò)溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度，常用法為比濁法，又可稱(chēng)為透射比濁法和散射比濁法。臨床上多用于對(duì)抗原或抗體的定量分析。