電阻抗法血細胞計數(shù)原理又名庫爾特原理。
1.紅細胞檢測原理:將等滲電解質(zhì)溶液稀釋的細胞懸液置入不導(dǎo)電的容器中,將小孔管(也稱傳感器)插進細胞懸液中。小孔管內(nèi)充滿電解質(zhì)溶液,并有一個內(nèi)電極,小孔管的外側(cè)細胞懸液中有一個外電極。當(dāng)接通電源后,位于小孔管兩側(cè)電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流,稀釋細胞懸液從小孔管外側(cè)通過小孔管壁上寶石小孔(直徑<100μm,厚度約75μm)向小孔管內(nèi)部流動,使小孔感應(yīng)區(qū)內(nèi)電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號,脈沖振幅越高,細胞體積越大,脈沖數(shù)量越多,細胞數(shù)量越多,由此得出血液中血細胞數(shù)量和體積值。
電阻抗原理示意圖
三分類血球分析儀工作原理示意圖
2.白細胞分類計數(shù)原理
根據(jù)電阻抗法原理,經(jīng)溶血劑處理的、脫水的、不同體積的白細胞通過小孔時,脈沖大小不同,將體積為35~450fl白細胞,分為256個通道,其中,淋巴細胞為單個核細胞、顆粒少、細胞小,位于35~90fl的小細胞區(qū),粒細胞(中性粒細胞)的核分多葉、顆粒多、胞體大,位于160fl以上的大細胞區(qū),單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始細胞、幼稚細胞等,位于90~160fl的單個核細胞區(qū),又稱為中間型細胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例,計算出各亞群細胞的百分率,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理并同時計算各亞群細胞的絕對值,顯示白細胞體積分布直方圖。
3.血紅蛋白測定原理
當(dāng)稀釋血液中加入溶血劑后,紅細胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑中的某些成分結(jié)合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(530~550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中Hb含量成正比,最終顯示Hb濃度。不同類型血液分析儀,溶血劑配方不同,所形成血紅蛋白衍生物不同,吸收光譜不同,如含氰化鉀的溶血劑,與血紅蛋白醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理作用后形成氰化血紅蛋白,其最大吸收峰接近540nm。