(一)檢測(cè)原理
網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret,RET)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過(guò)渡細(xì)胞,屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA),經(jīng)活體染色(新亞甲藍(lán)、燦爛甲酚蘭(煌焦油藍(lán))、中性紅等染料)后,形成核酸與堿性染料復(fù)合物,呈深染的顆粒狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。凡含兩個(gè)以上的深染顆?;蚓哂芯€網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的無(wú)核紅細(xì)胞,即為網(wǎng)織紅細(xì)胞。
1、普通光學(xué)顯微鏡法:在顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分比或分?jǐn)?shù)。
2、網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法和血液分析儀法:用熒光染料(如吖啶橙、派若寧-Y、噻唑橙)使網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)RNA著色,用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)得到網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。
(二)方法學(xué)評(píng)價(jià)
1、普通光學(xué)顯微鏡法:試管法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性較好。玻片法取血量少、染色時(shí)水分易蒸發(fā),造成結(jié)果偏低。但顯微鏡法受主觀因素影響較多,且耗時(shí)費(fèi)力。
2、網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法:可客觀地將Ret分成高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(HFR)、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(MFR)、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(LFR)三類,有助于化療、放療、移植患者的監(jiān)測(cè)。
3、血液分析儀法:可提供網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(Ret)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Ret%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞分布寬度(RDWr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MCVr/MRV)、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(HCr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHCr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度(HDWr)、LFR、MFR、HFR、醫(yī)學(xué)*教育*網(wǎng)整理網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)(RMI,RMI=(MFR+HFR)/LFR×100)。儀器法優(yōu)點(diǎn)是測(cè)量細(xì)胞多、避免主觀因素、方法易于標(biāo)準(zhǔn)化。
(三)質(zhì)量控制
1、顯微鏡法
影響因素有:操作人員對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞識(shí)別不同、血涂片質(zhì)量好壞、計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)量多少、計(jì)數(shù)方法等。Miller窺盤法計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞誤差可減小,網(wǎng)織紅細(xì)胞95%可信限為:
2、儀器法:儀器法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞10000~50000個(gè)。出現(xiàn)Howell-Jolly小體、有核紅細(xì)胞、巨大血小板會(huì)使結(jié)果假性增高。
(四)參考值
顯微鏡計(jì)數(shù)法:成人0.008~0.02或(25~75)×10 9/L,新生兒0.02~0.06。儀器法:表1-2-5。RMI:男性為9.1%~32.2%,女性為12.8%~33.7%。
(五)臨床意義
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