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    時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定基本原理

    2021-02-01 10:10 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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    時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定基本原理是什么?為了幫助檢驗(yàn)職稱考生了解,助力檢驗(yàn)職稱考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:

    1.時(shí)間分辨

    正常組織在激發(fā)光照射下可以發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,但該熒光壽命較短(1~10ns),而鑭系元素螯合物的熒光壽命較長(zhǎng)(10~1000μs)。故待短壽命背景熒光完全衰變后再測(cè)定鑭系元素離子螯合物的特異性熒光信號(hào)。

    2.Stokes位移

    激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的波長(zhǎng)差,如果Stokes位移小,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜常有重疊,相互干擾,影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。鑭系元素位移大。

    3.發(fā)射光譜和激發(fā)光譜

    鑭系元素發(fā)射光譜帶較窄,多在613nm±1Onm。利用濾光片只允許此波段的熒光通過,避免干擾。

    4.熒光標(biāo)記物的相對(duì)比活性

    比活性是指單位時(shí)間內(nèi)每個(gè)標(biāo)記分子可被探測(cè)到的信號(hào)量。

    5.信號(hào)增強(qiáng)

    Eu3+標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物在弱堿性溶液中被激發(fā)后的熒光信號(hào)較弱,加入一種酸性增強(qiáng)液可使Eu3+從復(fù)合物上完全解離下來,并與另一種螯合劑所螯合,以增強(qiáng)熒光信號(hào)。

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