艾滋病幾種檢測(cè)方法的研討：

艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合癥，由感染“HIV”病毒引起。HIV是一種能攻擊人體免疫系統(tǒng)的病毒，它可以侵襲人的免疫體系，并終極損壞人體的免疫功效。隨著人體免疫力的下降，人會(huì)越來越頻繁地感染上各種致病微生物，而且感染的水平也會(huì)變得越來越來重，終極會(huì)因各種復(fù)合感染而導(dǎo)致逝死亡。艾滋病嚴(yán)重威脅人類的身心健康，當(dāng)我們出現(xiàn)一些異樣的癥狀后，應(yīng)該選擇什么樣的檢測(cè)方法，怎樣確診自己是否患有艾滋病就顯得格外重要。按規(guī)定的檢測(cè)程序?qū)?a href="http://thedailypurge.net/jibing/aizibing/" target="_blank" title="艾滋病" class="hotLink">艾滋病的檢測(cè)方法研討如下。

1.材料和方法

1.1材料：選取我院臨床初篩檢測(cè)病例72例，其中男性40例，女性32例。年齡28-63歲，平均39歲。

1.2臨床癥狀：初期的開始癥狀像傷風(fēng)、流感、全身疲勞無力、食欲減退、發(fā)熱、體重減少、隨著病情的加重，癥狀日見增多，如皮膚、粘膚出現(xiàn)白色念球菌感染，單純皰疹、帶狀皰疹、紫斑、血腫、血皰、滯血斑、皮膚容易損傷，傷后出血不止等。

1.3方法：目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要包括抗HIV病毒抗體檢測(cè)、核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)。其中對(duì)病毒抗體的檢測(cè)是艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的方法

1.3.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：目前應(yīng)用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過99%.在一些特殊情況下，當(dāng)抗體檢測(cè)無法滿足HIV感染診斷的需要時(shí)，病毒分離及測(cè)定、核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)可作為輔助手段使用，這包括對(duì)非典型血清學(xué)反應(yīng)樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對(duì)特殊樣品的診斷。

1.3.2明膠顆粒凝集法（PA）：它是快速、簡(jiǎn)便的一種篩選方法。PA的基本過程是先將樣品稀釋，然后分別加入經(jīng)抗原致敏的和未致敏的明膠顆粒，混勻后保溫（一般為室溫）。當(dāng)血清中有HIV抗體存在時(shí)，經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。PA操作簡(jiǎn)便，無需特殊儀器設(shè)備，適合對(duì)少量標(biāo)本的檢測(cè)。是對(duì)大量人群初篩實(shí)驗(yàn)使用的方法，例公民義務(wù)獻(xiàn)血的初篩檢測(cè)醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

1.3.3免疫熒光試驗(yàn)（IFA）：基本原理為應(yīng)用H9或HUT78培養(yǎng)細(xì)胞作為載體，用HIV感染細(xì)胞，該細(xì)胞內(nèi)就會(huì)含有HIV抗原，將HIV感染的淋巴細(xì)胞涂于玻片上固定，制備為抗原片，加入待檢血清，待檢血清中的抗HIV抗體與抗原結(jié)合后，再與熒光素標(biāo)記的抗人Ig結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見到細(xì)胞內(nèi)有黃綠色熒光。

1.3.4免疫印跡試驗(yàn)：主要用于確認(rèn)試驗(yàn)，基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過SDSPAGE電泳，將分子量大小不等的蛋白帶分離開來，然后再把這些已經(jīng)分離的不同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將此膜切割成條狀，每一條硝酸纖維素膜上均含有經(jīng)電泳分離過的HIV病毒抗原。將待檢血清樣品用稀釋液稀釋成1/100，再把它直接加到硝酸纖維素膜上，恒溫震蕩，使其充分接觸反應(yīng)，血清中若含有抗HIV抗體，就會(huì)與膜條上的抗原帶相結(jié)合并呈現(xiàn)紫褐色。此確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室是初篩陽(yáng)性的標(biāo)本送檢省疾控的HIV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或市疾控的HIV中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的。

1.3.5病毒核酸檢測(cè)：是通過檢測(cè)HIVRNA水平來反映病毒載量，具有很高的靈敏度，使用適時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)，能夠在HIV感染的前2周檢測(cè)到病毒核酸。病毒核酸檢測(cè)方法可用于HIV的早期診斷，如窗口期輔助診斷、病程監(jiān)控、指導(dǎo)治療方案及療效測(cè)定、預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程等。目前常用的測(cè)定方法有逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)（RTPCR）、核酸序列擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)（NASBA）、分支DNA雜交實(shí)驗(yàn)（bDNA）等。使用高靈敏度的適時(shí)熒光PCR技術(shù)，能夠在HIV感染的前2周檢測(cè)到病毒核酸。此種檢測(cè)是在HIV感染確診之后，判定使用抗病毒藥物的檢測(cè)指標(biāo)，現(xiàn)在可有省疾控中心的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室完成。

2.結(jié)果

經(jīng)過我院的檢測(cè)和分析后，14例送檢經(jīng)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，未確診艾滋病感染。

3.討論

近年來，HIV檢測(cè)技術(shù)取得了很大進(jìn)展，但是仍有不足的地方。例如ELISA法第四代試劑增加了P24抗原的檢測(cè)，p24抗原檢測(cè)能夠在病毒開始復(fù)制后檢測(cè)到血液中的可溶性p24抗原，但易出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此，陽(yáng)性結(jié)果必須經(jīng)中和試驗(yàn)確認(rèn)，該結(jié)果才可作為HIV感染的輔助診斷依據(jù)。還有病毒核酸檢測(cè)方法具有很高的靈敏度，對(duì)疾病進(jìn)展的監(jiān)測(cè)、抗病毒療效觀察和耐藥性監(jiān)測(cè)非常重要。但是，由于HIV基因的多樣性，沒有一套引物可以覆蓋所有的HIV序列，使檢測(cè)的敏感性又受到限制。

HIV感染的診斷是艾滋病預(yù)防控制工作的重要組成部分，建立敏感實(shí)用的檢測(cè)方法對(duì)于監(jiān)測(cè)、診斷或血液篩查，控制艾滋病的流行顯得尤為重要?？偨Y(jié)以上討論的檢測(cè)方法，我們得出的結(jié)論是，既要提高檢測(cè)的敏感性、特異性，縮短窗口期，又要簡(jiǎn)便、快速和降低成本已成為HIV檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的要求和方向，很多的研究正致力于尋找病毒檢測(cè)的替代技術(shù)。