間接凝集反應知識點來嘍!
只要堅持、努力,勝利就會屬于你!“間接凝集反應”是檢驗職稱考試需要掌握的知識,那“間接凝集反應”有什么知識點呢?以下是醫(yī)學教育網(wǎng)小編為大家整理的“間接凝集反應”的相關知識,希望有助于大家備考!祝大家考試順利,取得好成績!
間接凝集反應是將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當大小的顆粒性載體表面,然后與相應抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象。
一、間接凝集反應的類型
(一)正向間接凝集反應
可溶性抗原致敏載體,用以檢測標本中待測抗體的凝集反應,稱為正向間接凝集反應。
(二)反向間接凝集反應
特異性抗體致敏載體,用以檢測標本中待測抗原的凝集反應,稱為反向間接凝集反應。
(三)間接凝集抑制反應
先將可溶性抗原(或抗體)與相應的抗體(或抗原)混合,然后再加入抗原(或抗體)致敏的載體顆粒,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,則說明標本中不存在相同抗原,抗體試劑未被結合。
若存在相同抗原,抗體與之結合,凝集反應被抑制,稱為正向(或反向)間接凝集抑制試驗。間接血凝抑制試驗可用于檢測抗體也可測定抗原。
(四)協(xié)同凝集反應
協(xié)同凝集反應與間接凝集反應的原理相類似,但所用載體為金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)。
SPA具有與IgG的Fc段結合的特性,因此當這種葡萄球菌與IgG抗體連接時,就成為抗體致敏的顆粒載體。如與相應抗原接觸,即出現(xiàn)反向間接凝集反應。協(xié)同凝集反應也適用于細菌病毒的直接檢測。
二、間接血凝試驗
(一)原理:抗原(或抗體)包被于紅細胞表面,成為致敏載體,然后與相應的抗體(或抗原)結合,從而使紅細胞被動的凝聚在一起,出現(xiàn)可見的紅細胞凝集現(xiàn)象。
(二)載體:最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細胞及O型人紅細胞。
致敏的新鮮紅細胞只能使用2~3天。因此在致敏前先將紅細胞醛化,可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細胞經(jīng)醛化后體積略有增大,兩面突起呈圓盤狀。
(三)致敏:致敏用的抗原或抗體要求純度高,并保持良好的免疫活性。
(四)血凝試驗:可在微量滴定板或試管中進行,將標本倍比稀釋,一般為1:64。凡紅細胞沉積于孔底,集中呈一圓點的為不凝集(-)。如紅細胞凝集,則分布于孔底周圍。以++凝集(紅細胞沉積于管底呈環(huán)狀,四周有凝集的小塊)的孔為滴度終點。
三、膠乳凝集試驗
是一種間接凝集試驗,載體為聚苯乙烯膠乳,帶有負電荷,可物理性吸附蛋白分子,但這種結合牢固性差。
膠乳凝集試驗分試管法和玻片法兩種。
四、明膠凝集試驗
是一種間接凝集試驗,將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒上,當致敏顆粒與樣品血清作用時,若血清含有抗病毒抗體則可形成肉眼可見的粉紅色凝集。
該方法應用于HIV-1抗體和抗精子抗體檢測等。
五、間接凝集反應的應用
(一)抗原的檢測
反向間接凝集試驗用于檢測病原體可溶性抗原,也可用于檢測各種蛋白質(zhì)成分。
(二)抗體的檢測
可用于檢測細菌、病毒和寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體,例如間接凝集試驗或明膠顆粒凝集試驗用于檢測抗人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體以診斷艾滋病、膠乳凝集試驗用于檢測抗溶血素等。
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