關于中藥有效成分的分離方法——結晶法的概述，醫(yī)學教育網(wǎng)小編專門整理如下，請各位主管中藥師考生仔細查看。

鑒定中草藥化學成分，研究其化學結構，必須首先將中草藥成分制備成單體純品。在常溫下，物質本身性質是液體的化臺物，可分別用分餾法或層析法進行分離精制。一般他說，中草藥化學成分在常溫下多半是固體的物質，都具有結晶他的通性，可以根據(jù)溶解度的不同用結晶法來達到分離精制的目的。研究中草藥化學成分時，一旦獲得結晶，就能有效地進一步精制成為單體純品。純化臺物的結晶有一定的熔點和結晶學的特征，有利于鑒定。如果鑒定的物質不是單體純品，不但不能得出正確的結論，還會造成工作上的浪費。因此，求得結晶并制備成單體純品，就成為鑒定中草藥成分、研究其分子結構重要的一步。

1．雜質的除去：中草藥經(jīng)過提取分離所得到的成分，大多仍然含有雜質，或者是混合成分。有時即使有少量或微量雜質存在，也能阻礙或延緩結晶的形成。所以在制備結晶時，必須注意雜質的干擾，應力求盡可能除去。有時可選用溶劑溶出雜質，或只溶出所需要的成分。有時可用少量活性炭等進行脫色處理，以除去有色雜質。有時可通過氧化鋁，硅膠或硅藻土短柱處理后，再進行制備結晶。但應用吸附劑除去雜質時，要注意所需要的成分也可能被吸附而損失。此外，層析法更是分離制備單體純品所常用的有效方法。

如果一再處理仍未能使近于純品的成分結晶化，則可先制備其晶態(tài)的衍生物，再回收原物，可望得到結晶。例如游離生物堿可制備各種生物堿鹽類，羥基化合物可轉變成乙酸化物，碳基化臺物可制備成苯蹤衍生物結晶。美登堿在原料中含量少，且反復分離精制難以得到結晶，但制備成3一滇丙基美登堿結晶后，再經(jīng)水解除去澳丙基，美登堿就能制備成為結晶。

2．溶劑的選擇；制備結晶，要注意選擇合宜的溶劑和應用適量的溶劑。合宜的溶劑，最好是在冷時對所需要的成分溶解度較小，而熱時溶解度較大。溶劑的沸點亦不宜太高。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙醋等。但有些化合物在一般溶劑中不易形成結晶，而在某些溶劑中則易于形成結晶。例如葛根素、逆沒食子酸（ellagicacid）在冰醋酸中易形成結晶，大黃素（emodin）在吡啶中易于結晶，萱草毒素（hemerocallin）在N，N一二甲基甲酞胺（DMF）中易得到結晶，而穿心蓮亞硫酸氫鈉加成物在丙酮一水中較易得到結晶。又如蝙蝠葛堿通常為無定形粉未，但能和氯仿或乙醚形成為加成物結晶。

3．結晶溶液的制備：制備結晶的溶液，需要成為過飽和的溶液。一般是應用適量的溶劑在加溫的情況下，將化合物溶解再放置冷處。如果在室溫中可以析出結晶，就不一定放置于冰箱中，以免伴隨結晶析出更多的雜質。“新生態(tài)”的物質即新游離的物質或無定形的粉未狀物質，遠較晶體物質的溶解度大，易于形成過飽和溶液。一般經(jīng)過精制的化合物，在蒸去溶劑抽松為無定形粉未時就是如此，有時只要加入少量溶劑，往往立即可以溶解，稍稍放置即能析出結晶。例如長春花總弱堿部分抽松后加入1．5倍量的甲醇溶解，放置后很訣析出長春堿結晶。又如蝙蝠葛堿在乙醚中很難溶解，但當其鹽的水溶液用氨液堿化，并立即用乙醚萃取，所得的乙醚溶液，放置后即可析出蝙蝠葛堿的乙醚加成物結晶。

制備結晶溶液，除選用單一溶劑外，也常采用混合溶劑。一般是先將化合物溶于易溶的溶劑中，再在室溫下滴加適量的難溶的溶劑，直至溶液微呈渾濁，并將此溶液微微加溫，使溶液完全澄清后放置。例如J一細辛醚重結晶時，可先溶于乙醇，再滴加適量水，即可析出很好的結晶。又如自虎杖中提取水溶性的虎杖甙時，在已精制飽和的水溶液上添加一層乙醚放置，既有利于溶出其共存的脂溶性雜質，又可降低水的極性，促使虎杖俄的結晶化。自秦皮中提取七葉甙（秦皮甲素），也可運用這樣的辦法。

結晶過程中，一般是溶液濃度高，降溫訣，析出結晶的速度也快些。但是其結晶的顆粒較小，雜質也可能多些。有時自溶液中析出的速度太快，超過化合物晶核的形成勸分子定向排列的速度，往往只能得到無定形粉未。有時溶液太濃，粘度大反而不易結晶化。如果溶液濃度適當，溫度慢慢降低，有可能析出結晶較大而純度較高的結晶。有的化合物其結晶的形成需要較長的時間，例如鈴蘭毒甙等，有時需放置數(shù)天或更長的時間。

4．制備結晶操作：制備結晶除應注意以上各點外，在放置過程中，最好先塞緊瓶塞，避免液面先出現(xiàn)結晶，而致結晶純度較低。如果放置一段時間后沒有結晶析出，可以加入極微量的種晶，即同種化合物結晶的微小顆粒。加種晶是誘導晶核形成常用而有效的手段。一般他說，結晶化過程是有高度選擇性的，當加入同種分子或離子，結晶多會立即長大。而且溶液中如果是光學異構體的混合物，還可依種晶性質優(yōu)先析出其同種光學異構體。沒有種晶時，可用玻璃棒蘸過飽和溶液一滴，在空氣中任溶劑揮散，再用以磨擦容器內壁溶液邊緣處，以誘導結晶的形成。如仍無結晶析出，可打開瓶塞任溶液逐步揮散，慢慢析晶?；蛄磉x適當溶劑處理，或再精制一次，盡可能除盡雜質后進行結晶操作。

5．重結晶及分步結晶：在制備結晶時，最好在形成一批結晶后，立即傾出上層溶液，然后再放置以得到第二批結晶。晶態(tài)物質可以用溶劑溶解再次結晶精制。這種方法稱為重結晶法。結晶經(jīng)重結晶后所得各部分母液，再經(jīng)處理又可分別得到第二批、第三批結晶。這種方法則稱為分步結晶法或分級結晶法。晶態(tài)物質在一再結晶過程中，結晶的析出總是越來越快，純度也越來越高。分步結晶法各部分所得結晶，其純度往往有較大的差異，但常可獲得一種以上的結晶成分，在未加檢查前不要貿然混在一起。

6．結晶純度的判定：化合物的結晶都有一定的結晶形狀、色澤、熔點和熔距，一可以作為鑒定的初步依據(jù)。這是非結晶物質所沒有的物理性質?；衔锝Y晶的形狀和熔點往往因所用溶劑不同而有差異。原托品堿在氯仿中形成棱往狀結晶，熔點207℃；在丙酮中則形成半球狀結晶，熔點203℃；在氯仿和丙酮混合溶劑中則形成以上兩種晶形的結晶。又如N一氧化苦參堿，在無水丙酮中得到的結晶熔點208℃，在稀丙酮（含水）析出的結晶為77～80℃。所以文獻中常在化合物的晶形、熔點之后注明所用溶劑。一般單體純化合物結晶的熔距較窄，有時要求在0．5℃左右，如果熔距較長則表示化合物不純。

但有些例外情況，特別是有些化合物的分解點不易看得清楚。也有的化合物熔點一致，熔距較窄，但不是單體。一些立體異構體和結構非常類似的混合物，常有這樣的現(xiàn)象。還有些化合物具有雙熔點的特性，即在某一溫度已經(jīng)全部融熔，當溫度繼續(xù)上升時又固化，再升溫至一定溫度又熔化或分解。如防己諾林堿在1760C時熔化，至200℃時又固化，再在2420C時分解。中草藥成分經(jīng)過同一溶劑進行三次重結晶，其晶形及熔點一致，同時在薄層層析或紙層層析法經(jīng)數(shù)種不同展開劑系統(tǒng)檢定，也為一個斑點者，一般可以認為是一個單體化合物。但應注意，有的化合物在一般層析條件下，雖然只呈現(xiàn)一個斑點，但并不一定是單體成分。例如鹿含草中主成分為高熊果砍，異高熊果甙極難用一般方法分離，經(jīng)反復結晶后，在紙層及聚酞胺薄層上都只有一個斑點，易誤認為單一成分，但測其熔點在115～125℃，熔距很長。經(jīng)制備其甲醚后，再經(jīng)紙層層析檢定，可以出現(xiàn)兩個斑點，異高熊果甙的比移值大于高熊果甙。又如水菖蒲根莖揮發(fā)油中的α一細辛醚和β一細辛醚，在一般薄層上均為一個斑點，前者為結晶，熔點63℃，后者為液體沸點296℃，用硝酸銀薄層或氣相層忻很容易區(qū)分。有時個別化合物（如氨基酸）可能部分地與層析紙或薄層上的微量金屬離子（如Cu）、酸或堿形成絡合物、鹽或分解而產生復斑。因此，判定結晶純度時，要依據(jù)具體情況加以分析。此外，高壓液譜、氣相層析、紫外光譜等，均有助于檢識結晶樣品的純度。

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