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1、根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離
(1)利用溫度不同引起溶解度的改變進(jìn)行分離,主要包括結(jié)晶及重結(jié)晶。
(2)常用的重結(jié)晶溶劑有:極性由大到小分別是水、冰醋酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、三氯甲烷、苯、四氯化碳、石油醚、二硫化碳。
(3)一般可根據(jù)下述幾點(diǎn)來判斷結(jié)晶純度:
①結(jié)晶形態(tài)與色澤:結(jié)晶均勻、一致。
②熔點(diǎn)與熔距:熔點(diǎn)明確、熔距敏銳(1——2℃)
③色譜法:多種溶劑展開劑展開,呈單一斑點(diǎn)。
④高效液相色譜法、質(zhì)譜、核磁共振等方法。高效液相最為常用。
(4)利用沉淀試劑進(jìn)行分離:生物堿,可與專屬試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。
2、根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離
液-液分配柱色譜用的載體主要有硅膠、硅藻土及纖維素粉等。
(1)正相色譜:分離水溶性或極性較大的成分
(2)反相色譜:分離脂溶性化合物
常用反相硅膠薄層及柱色譜的填料系將普通硅膠進(jìn)行化學(xué)修飾,鍵合上長度不同的烴基(R)、形成親油表面而成。根據(jù)烴基長度為乙基還是辛基或十八烷基,分別命名為RP-2、RP-8及RP-18。
3、根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別進(jìn)行分離
(1)物理吸附:特點(diǎn)是無選擇性,吸附與解吸附過程可逆,且可快速進(jìn)行, 故在實(shí)際工作中用得最廣。
(2)化學(xué)吸附
(3)半化學(xué)吸附。
吸附規(guī)律:相似者易于吸附?;钚蕴窟M(jìn)行的脫色、脫臭。
極性強(qiáng)弱
常用溶劑的極性:己烷<苯<乙醚(無水)<三氯甲烷<乙酸乙酯<乙醇<甲醇<水。
吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離
為避免發(fā)生化學(xué)吸附,酸性物質(zhì)宜用硅膠,堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。
分離酸性物質(zhì)時,洗脫劑中加入適量的乙酸。
分離堿性物質(zhì)時,洗脫劑中加入適量的氨、吡啶、二乙胺。
聚酰胺吸附色譜法:屬于“氫鍵吸附”, 特別適用分離酚類、醌類、黃酮類化合物。
(1)對酚類、黃酮類化合物的吸附是可逆的,故特別適合于該類化合物的制備分離。
(2)因?qū)分频奈教貜?qiáng),近乎不可逆,故用于植物粗提取物的脫鞣處理特別適宜。
大孔吸附樹脂
具有選擇性吸附(范德華引力或產(chǎn)生氫鍵)和分子篩的性能。
應(yīng)用于糖與苷類的分離,生物堿的精制。
4、根據(jù)物質(zhì)分子大小:凝膠過濾法、膜分離法。
(1)凝膠過濾法:分子由大到小的順序先后流出并得到分離。
常用的有葡聚糖凝膠以及羥丙基葡聚糖凝膠。
葡聚糖凝膠的性質(zhì):在水中不溶,但可膨脹。
(2)膜分離法:膜過濾技術(shù)主要包括滲透、反滲透、超濾、電滲析和液膜技術(shù)等。
5、根據(jù)物質(zhì)解離程度:離子交換法。
離子交換法的應(yīng)用:酸性化合物—醌類、黃酮;堿性化合物—生物堿;兩性化合物—具兩性基團(tuán)的生物堿。
6、根據(jù)物質(zhì)的沸點(diǎn):分餾法(揮發(fā)油)。
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