醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理臨床檢驗(yàn)技士考試資料“免疫組化技術(shù)切片方法的選擇”相關(guān)信息供大家參考學(xué)習(xí),更多考試信息請(qǐng)關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)官方論壇。
應(yīng)用于光鏡的免疫組織化學(xué)染色的切片厚度一般要求5μm左右,神經(jīng)組織的研究要求切片厚度在20-100μm,有利于追蹤神經(jīng)纖維的走行。
1、冰凍切片:
是免疫組織化學(xué)染色中最常用的一種切片方法。其最突出的優(yōu)點(diǎn)是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細(xì)胞表面抗原更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。
冰凍時(shí),組織中水分易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時(shí),影響較小,冰晶小而多時(shí),對(duì)組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理冰晶的大小與其生長(zhǎng)速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此,應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開始時(shí),冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33℃,從-30℃降至-43℃之間,成核率急劇增加達(dá)1018,然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成。
……