黃酮類化合物的柱色譜分離法：

分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠及纖維素粉等。

1.硅膠柱色譜：主要適用于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙醚化）的黃酮及黃酮醇類。

2.聚酰胺柱色譜：對分離黃酮類化合物來說，聚酰胺是較為理想的吸附劑。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)收集整理其吸附強(qiáng)度主要取決于黃酮類化合物分子中羥基的數(shù)目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。

黃酮類化合物從聚酰胺柱上洗脫時(shí)大體有下述規(guī)律：

①苷元相同，洗脫先后順序一般是：參糖苷、雙糖苷、單糖苷、苷元。

②苷元母核上增加羥基，洗脫速度相應(yīng)減慢。

③不同類型黃酮類化合物，洗脫先后順序一般是：異黃酮、二氫黃酮、黃酮、黃酮醇。

④分子中芳香核、共軛雙鍵多者易被吸附，故查耳酮比相應(yīng)的二氫黃酮難于洗脫。

3.葡聚糖凝膠柱色譜：分離游離黃酮時(shí)，主要靠吸附作用，苷元的羥基數(shù)目越多，越難以洗脫；分離黃酮苷時(shí)，則分子篩的性質(zhì)起主導(dǎo)作用，苷的分子量越大，其上聯(lián)結(jié)糖的數(shù)目越多，越容易洗脫。