共軛亞油酸（conjugated linoleic cid，CLA），是指一類亞油酸的位置和空間共軛二烯異構(gòu)體，其中cis-9，trans-11和trans-10，cis-12異構(gòu)體被認(rèn)為具有生理活性。兩種異構(gòu)體都是天然產(chǎn)物，其中cis-9，trans-11CLA，是飲食來源CLA的主要形式。共軛亞油酸是存在于人和動(dòng)物體內(nèi)的一種營養(yǎng)物質(zhì)，20世紀(jì)80年代后期，美國科學(xué)家在研究烤牛肉中的致癌物質(zhì)時(shí)，偶然發(fā)現(xiàn)了一種具有抗癌變作用的物質(zhì)，后來的研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，其還具有、抗動(dòng)脈硬化、抗氧化 ［1～2］ 、提高免疫力、增加骨骼密度、降低人和動(dòng)物體脂肪、增加肌肉 ［3～5］ 等生理功能。由于這是一種天然存在于人和動(dòng)物中的活性物質(zhì)，最近十幾年來國際上活性脂類研究方面最活躍的領(lǐng)域之一。國外研究表明，共軛亞油酸在一定劑量下對(duì)健康人是安全的 ［6～7］ 。將CLA產(chǎn)品開發(fā)為食品或藥品，必須進(jìn)行相關(guān)的毒理學(xué)評(píng)價(jià)。因此，本文開展CLA毒理學(xué)研究，以期為將CLA開發(fā)成為功能食品和藥品提供科學(xué)依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　1.1 樣品

　　液體共軛亞油酸，共軛亞油酸含量71.77%（c9t11CLA，34.14%;10c12CLA，34.07%;其他CLA，3.56%），青島澳海生物有限公司。共軛亞油酸標(biāo)準(zhǔn)品，sigma公司提供。

　　1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

　　二級(jí)昆明種小白鼠（醫(yī)動(dòng)字第01-3001號(hào)），二級(jí)Wistar大鼠（醫(yī)動(dòng)字第01-3008號(hào)）。購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物研究所試驗(yàn)動(dòng)物繁殖場。以小鼠為材料進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn);以大鼠為材料進(jìn)行生理生化試驗(yàn)。

　　1.3 劑量選擇

　　依人體推薦劑量為0.1g·kg -1 ·d -1 為依據(jù)，設(shè)定各試驗(yàn)項(xiàng)目、各試驗(yàn)組的大、小鼠飼喂CLA量，分別為2.50、5.00、10.00g/kg，相當(dāng)于人推薦量的25、50、100倍。用花生油將樣品配制所需濃度，同時(shí)設(shè)立普通對(duì)照組和模型對(duì)照組（均灌花生油），測各項(xiàng)指標(biāo)。

　　1.4 試驗(yàn)方法

　　1.4.1 小鼠急性毒性試驗(yàn)

　　選擇小鼠20只，雄性（♂）和雌性（♀）各10只，體重為18～22g。每天2次灌胃給予受試物，劑量為20g/kg，觀察14天，記錄動(dòng)物中毒表現(xiàn)及死亡情況。

　　1.4.2 小鼠遺傳毒性試驗(yàn)

　　1.4.2.1 艾姆斯（Ames）試驗(yàn)

　　試驗(yàn)菌株為鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102，體外活化系統(tǒng)為多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿制備的S-9混合液。根據(jù)毒性測定結(jié)果，試驗(yàn)設(shè)250、500、2500、5000μg/皿，共5個(gè)劑量，同時(shí)設(shè)立自發(fā)回變組、溶劑對(duì)照組和陽性對(duì)照組。陽性對(duì)照組試劑分別為（1）瘧的平，250μg/皿;（2）正丁霉素，50μg/皿;（3）疊氮鈉，100μg/皿;（4）絲裂霉素，0.5μg/皿;（5）2-AF，50μg/皿。 醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理

　　1.4.2.2 小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)

　　選擇體重25 ～30g小鼠50只，隨機(jī)分為5組，雌雄各半。3個(gè)試驗(yàn)組中受試物劑量分別為2.50、5.00、10.00g/kg·bw，另設(shè)陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組（環(huán)磷酰胺，40mg/kg·bw）。采用間隔24h兩次灌胃法試驗(yàn)，末次給予受試物后6h處死動(dòng)物，常規(guī)制片。

　　1.4.2.3 小鼠精子畸形試驗(yàn)和精細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)

　　選擇體重25～35g雄性小鼠50只，隨機(jī)分為10組。6個(gè)試驗(yàn)組中受試物劑量分別為2.50、5.00、10.00g/kg，另設(shè)陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組（環(huán)磷酰胺，40mg/kg）。灌胃給予受試物，連續(xù)5天，首次灌胃后第35天處死動(dòng)物，常規(guī)制片。3組試驗(yàn)組及相應(yīng)對(duì)照組，每只動(dòng)物記數(shù)1000個(gè)結(jié)構(gòu)完整的精子，記錄畸變類型和數(shù)量，計(jì)算精子畸形率（%）。另外3組試驗(yàn)組及相應(yīng)對(duì)照組，每只動(dòng)物記數(shù)100個(gè)精細(xì)胞中期分裂相，記錄畸變類型和數(shù)量，計(jì)算染色體畸變率（%）。1.4.3 大鼠喂養(yǎng)試驗(yàn)（30天） 選用體重40～60g斷乳大鼠80只，隨機(jī)分為4組，雌雄各半。3個(gè)實(shí)驗(yàn)組中受試物劑量分別為2.50、5.00、10.00g/kg，將受試物每天經(jīng)口灌胃給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料并同時(shí)灌胃給予葵花籽油。記錄大鼠進(jìn)食量、體重，連續(xù)觀察30天。

　　大鼠試驗(yàn)觀察和指標(biāo)測定。觀察大鼠的一般表現(xiàn)、體重、食物利用率（%）。血常規(guī)及生化指標(biāo);病理解剖:臟器系數(shù)、觀察及病理組織檢查。

　　1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　用Foxprow軟件建立數(shù)據(jù)庫，用EPI軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。