我國PT測定標準化和質(zhì)量控制的方案,供討論。
一、原理
將凝血活酶(主要含組織因子和脂質(zhì))和鈣離子,加到枸櫞酸抗凝血漿中,在37℃保溫,測定血漿凝固時間,即為PT.本法主要用于過篩檢測外源凝血途徑的第VII、II、V、X因子和相關(guān)因子的抑制物。
二、試劑
1、抗凝劑:109mmo1/L枸櫞酸鈉液(相當于含二分子結(jié)晶水的櫞酸鈉32g/L)
2、凝血活酶試劑:市售商品,應(yīng)標有ISI、批號及有效期。凍干者應(yīng)按說明書加指定的緩沖稀釋劑復(fù)溶。
3、氯化鈣(CaCl2)溶液,濃度為25mmo1/L。
?。壳坝行┥唐吩噭┮褜⒛蠲敢号c氯化鈣液混合好,可不必另配CaCl2液)
4、質(zhì)控物,正常及異常對照血漿。
三、儀器
1、手工法:秒表,保持37℃±1℃的恒溫水浴箱或電熱塊。
2、儀器法:各種自動或半自動凝血儀,嚴格按說明書操作。
四、血液樣品的采集、運送及貯存
1、用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器。采血時止血帶不可束縛過緊,并不應(yīng)超過5分鐘。(針管內(nèi)見到血即應(yīng)解開止血帶)否則某些凝血及纖溶因子會活化,并可能使Hct長高。
2、血與枸櫞酸鈉抗凝劑按9:1混合,輕輕顛倒混勻。可用特制的已加有定量枸櫞酸鈉液的抽空硅化管(國內(nèi)已大量生產(chǎn))采血,可保證血與枸櫞酸鈉比例準確,防止凝血因子活化,并保持清潔,防止試管和不合格橡皮塞的污染。