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    均相酶免疫測(cè)定

    2009-09-17 14:22 來源:
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      均相酶免疫測(cè)定我們介紹如下兩點(diǎn):酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)和克隆酶供體免疫分析。

      1.酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)(EMIT):EMIT的基本原理是半抗原與酶結(jié)合成酶標(biāo)半抗原,保留半抗原和酶的活性。當(dāng)酶標(biāo)半抗原與抗體結(jié)合后,所標(biāo)的酶與抗體密切接觸,使酶的活性中心受到影響而活性被抑制。反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例,從酶活力的測(cè)定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。

      2.克隆酶供體免疫分析:DNA重組技術(shù)可分別合成某種功能酶(如β-D半乳糖苷酶)分子的兩個(gè)片段.大片段稱為酶受體(EA),小分子稱作酶供體(ED),兩者單獨(dú)均無酶活性,一定條件下結(jié)合形成四聚體方具酶活性??寺∶腹w免疫測(cè)定(CDEIA)的反應(yīng)模式為競(jìng)爭(zhēng)法,測(cè)定原理為:標(biāo)本中的抗原和酶供體(ED)標(biāo)記的抗原與特異性抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,形成兩種抗原抗體復(fù)合物。ED標(biāo)記的抗原與抗體結(jié)合后由于空間位阻,不再能與酶受體(EA)結(jié)合,而游離的ED標(biāo)記的抗原上的ED可和EA結(jié)合,形成具有活性的酶,加入底物測(cè)定酶活性,酶活力的大小與標(biāo)本中抗原含量醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理成正比。

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