間接凝集反應(yīng)是將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒載體表面,然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱間接凝集反應(yīng)。
根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的方式,間接凝集反應(yīng)分為4類:①正向間接凝集反應(yīng);②反向間接凝集反應(yīng);③間接凝集抑制反應(yīng);④協(xié)同凝集反應(yīng)。
間接凝集反應(yīng)適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測(cè)。以載體來(lái)分,常用的為紅細(xì)胞、膠乳顆粒及明膠顆粒等。
常用的試驗(yàn)有:
1.間接血凝試驗(yàn):其原理是將抗原(或)抗體包被于紅細(xì)胞表面,成為致敏載體,然后與相應(yīng)的抗體(或抗原)結(jié)合,從而使紅細(xì)胞被動(dòng)地凝聚在一起,出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象。
間接血凝試驗(yàn)可分為三類:①紅細(xì)胞包被抗原,用以檢測(cè)抗體的血凝,稱為正向間接血凝反應(yīng)(PHA);②紅細(xì)胞包被抗體,用以檢測(cè)抗原的血凝反應(yīng),稱為反向間接血凝反應(yīng)(RPHA);③先將可溶性抗原(或抗體)與相應(yīng)的抗體(或抗原)混合然后再加入抗原(或抗體)致敏的紅細(xì)胞,則能抑制原先的血凝現(xiàn)象,稱為正向(或反向)間接血凝抑制試驗(yàn)。間接血凝抑制試驗(yàn)醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理可用于檢測(cè)抗體、自身抗體、變態(tài)反應(yīng)性抗體,也可測(cè)定抗原。
間接血凝試驗(yàn) —:紅細(xì)胞沉積于管底;1+:紅細(xì)胞沉積于管底,周圍有散在少量凝集;2+:紅細(xì)胞形成片層凝集,面積較小,邊緣較松散;3+:紅細(xì)胞形成片層凝集,面積多于2+;4+:紅細(xì)胞形成片層凝集,均勻布滿孔底,或邊緣皺縮如花邊狀。
2.膠乳凝集試驗(yàn):膠乳凝集試驗(yàn)也是一種間接凝集試驗(yàn),所用載體為聚苯乙烯膠乳,是一種直徑約為0.8μm大小的圓形顆粒,帶有負(fù)電荷,可物理性吸附蛋白分子,但這種結(jié)合牢固性差。膠乳凝集試驗(yàn)分試管法和玻片法兩種。膠乳凝集試驗(yàn)用于檢測(cè)抗溶血素O、RF等。
3.明膠凝集試驗(yàn):將全病毒抗原及重組抗原吸附在粉紅色醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理明膠顆粒上,來(lái)檢測(cè)相應(yīng)抗體。
間接凝集反應(yīng)具有快速、敏感、操作簡(jiǎn)便、無(wú)需特殊的實(shí)驗(yàn)設(shè)備等特點(diǎn),而且能用于抗原或抗體的測(cè)定,因此在臨床檢驗(yàn)中廣為應(yīng)用。
(1)抗原的檢測(cè):反向間接凝集試驗(yàn)用于檢測(cè)病原體可溶性抗原,也可用于檢測(cè)各種蛋白質(zhì)成分。
?。?)抗體的檢測(cè):可用于檢測(cè)細(xì)菌、病毒和寄生蟲等感染后產(chǎn)生的醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理抗體,例如間接凝集試驗(yàn)或明膠顆粒凝集試驗(yàn)用于檢測(cè)抗人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體以診斷艾滋病、乳膠凝集試驗(yàn)用于檢測(cè)抗溶血素O等。
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