摘 要:目的探討不同基因型和亞型戊型肝炎病毒(HEV)ORF2重組蛋白p166用于抗體檢測的價(jià)值,為研發(fā)準(zhǔn)確可靠的戊型肝炎診斷試劑提供新的途徑。
方法 用等濃度的不同基因型和亞型HEV p166作為包被抗原,對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定。用HEV多基因型通用性引物逆轉(zhuǎn)錄套式PCR(RT-nPCR)擴(kuò)增標(biāo)本中HEV RNA,并測序、分型。
結(jié)果 8種不同p166抗原對(duì)30份健康獻(xiàn)血者血清無抗原性,對(duì)182份來自世界不同國家和地區(qū)的已知HEV抗體陽性血清和7份HEV實(shí)驗(yàn)感染動(dòng)物血清標(biāo)本均呈陽性反應(yīng),但所得血清抗體滴度的高低與所用抗原的基因型有明顯關(guān)系。RT-nPCR檢測的50份中國血清標(biāo)本中,19份陽性,基因分型均為Ⅳ型,與Ⅳ型中國株p166抗原反應(yīng)最好。而以同屬于第Ⅲ基因型的豬HEV新西蘭株和人HEV美國株重組p166檢測血清標(biāo)本,兩者結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以多基因型p166混合抗原建立的ELISA抗體檢測法與兩種市售試劑盒比較,前者敏感性高,特異性好。
結(jié)論 不同基因型和亞型的HEV重組蛋白p166對(duì)不同血清標(biāo)本HEV抗體檢測的敏感性高低不同,因此多基因型和亞型p166的混合抗原是HEV抗體檢測的最佳抗原。