摘 要：目的研究本室構(gòu)建的可溶性PD-1（sPD-1）真核表達(dá)質(zhì)粒pPD-1A的抑瘤機(jī)理。

　　方法 用轉(zhuǎn)染了pPD-1A的BHK細(xì)胞分泌產(chǎn)物去封閉樹突狀細(xì)胞上的PD-1配體（PD-L），并用MTT法檢測(cè)樹突狀細(xì)胞（DC）對(duì)小鼠脾細(xì)胞的增殖激活作用。BALB/c小鼠接種H22肝癌細(xì)胞后次日開始接受質(zhì)粒pPD-1A的注射。用RT-PCR法分析小鼠脾細(xì)胞的細(xì)胞因子和共刺激分子的mRNA表達(dá)水平，用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定腫瘤內(nèi)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量。

　　結(jié)果 在淋巴細(xì)胞活化的早期sPD-1對(duì)IL-10-DC激活淋巴細(xì)胞的作用有一定的促進(jìn)，但作用并不十分顯著（P＞0.05）。注射了質(zhì)粒pPD-1A的小鼠產(chǎn)生了較強(qiáng)的抗瘤免疫反應(yīng)，H22肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯受到抑制（P＜0.01）。脾臟淋巴細(xì)胞的4-1BB、B7.1、IFN-γ和TNF-α表達(dá)均上調(diào)，以IFN-γ的增加最明顯；OX40、IL-10表達(dá)下調(diào)。腫瘤內(nèi)TIL數(shù)量明顯增多（75.86%）。

　　結(jié)論 sPD-1通過對(duì)PD-L的封閉，不僅增加了腫瘤內(nèi)部CD3+T細(xì)胞的數(shù)量，而且可以調(diào)節(jié)細(xì)胞因子和共刺激分子的表達(dá)，從而促進(jìn)抗瘤免疫。