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    B型鈉尿肽固相時(shí)間分辨免疫熒光分析法的建立及其臨床應(yīng)用

    2009-03-13 15:52 來源:
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      摘 要:

      目的 采用一種新的銪螯合物BHHCT,制備高靈敏度熒光標(biāo)記物,建立B型鈉尿肽(BNP)固相時(shí)間分辨熒光免疫分析法(TrFIA).

      方法 使用2株匹配的單克隆抗體,其中1株可以識(shí)別BNP分子C-端區(qū),另1株生物素化單抗能識(shí)別分子內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu),分別作為捕獲抗體和檢測(cè)抗體,并利用制備的SA-BHHCT-Eu3+作為示蹤物,建立雙抗體夾心法,檢測(cè)正常對(duì)照組和心功能Ⅰ~Ⅳ級(jí)心力衰竭患者組血液BNP含量。

      結(jié)果 本法測(cè)定BNP的靈敏度為12 pg/ml,批內(nèi)和批間CV分別為3.9%和5.2%,平均回收率為97.3%,線性范圍為20~4 000 pg/ml。對(duì)照組(n=110)、心功能Ⅰ級(jí)(n=31)、Ⅱ級(jí)(n=30)、Ⅲ~Ⅳ級(jí)(n=25)各組血漿BNP濃度分別為(6937)、(8446)、(346134)和(932326)pg/ml;心衰各組BNP水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.001)。以BNP 100pg/ml為cut off值,診斷心力衰竭(HF)的特異性為82.4%,敏感性為91.6%。

      結(jié)論 應(yīng)用銪螯合物BHHCT建立的固相TrFIA法測(cè)定BNP,是一個(gè)很好的診斷心衰和監(jiān)測(cè)其嚴(yán)重程度的實(shí)驗(yàn)診斷指標(biāo)。

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