湯巧

　　摘 要：目的在大腸埃希菌中表達(dá)梅毒螺旋體Tp15-17嵌合抗原，用于臨床檢測(cè)梅毒感染.方法利用PCR法從Tp全基因組中分別擴(kuò)增目的基因Tp15和Tp17，用T4DNA連接酶連接后，克隆選表達(dá)載體pGEX-6P-1中，構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-6P-1+Tp15-17，在大腸埃希菌中表達(dá)重組Tp嵌合蛋白，重組蛋白經(jīng)親和層析柱純化后包被微孔板，初步建立間接ELISA法檢測(cè)血清中的抗Tp抗體。結(jié)果重組嵌合抗原獲得了高效表達(dá)，免疫印跡試驗(yàn)顯示重組抗原具有很強(qiáng)的抗原性.用重組嵌合抗原建立間接ELISA法，對(duì)梅毒螺旋體抗體陽(yáng)性參比血清及梅毒患者血清的檢測(cè)符合率100%。結(jié)論重組梅毒螺旋體嵌合抗原Tp15-17能夠作為梅毒螺旋體診斷性ELISA抗原。