病理性抗凝物檢測主要包括狼瘡抗凝物質(zhì)(LAC)測定和凝血因子Ⅷ抑制物檢測。
1.狼瘡抗凝物質(zhì)(LAC)測定
?。?)篩檢試驗(yàn)
1)原理:在腦磷脂和激活劑存在的條件下,檢測血漿凝固時間(即APTT)。若被檢血漿中有狼瘡抗凝物質(zhì)存在,則血漿凝固時間(APTT)延長。
2)參考值:37.5±4.5s
3)臨床意義:篩檢試驗(yàn)的血漿凝固時間延長(篩檢試驗(yàn)陽性)見于:有狼瘡抗凝物質(zhì)存在的患者、先天性凝血因子缺乏、口服抗凝劑、肝素治療以及DIC等。
?。?)確診試驗(yàn)
1)原理:篩檢是陽性的血漿,若屬于有狼瘡抗凝物質(zhì)存在者,則在加入血小板溶解物后,延長的APTT被糾正。
2)結(jié)果判斷:篩選試驗(yàn)測定值/確診試驗(yàn)測定值=0.8~1.2。若篩查試驗(yàn)和確診試驗(yàn)的凝固時間都延長,且比值在正常范圍內(nèi),提示被檢血漿中無狼瘡抗凝物存在,可能有其他異??鼓锎嬖?;若篩查試驗(yàn)的凝固時間延長,而確診試驗(yàn)的凝固時間縮短(被糾正),提示有狼瘡抗凝物存在。
3)臨床意義:狼瘡抗凝物存在,見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、自發(fā)性流產(chǎn)、多發(fā)性血栓形成和血小板減少癥等。
4)臨床評價:LAC的檢測也可利用改良的Russell蛇毒稀釋試驗(yàn)進(jìn)行檢測,該試驗(yàn)不受FⅫ及FⅦ異常的影響,受檢血漿中肝素含量<1.0U/mL對結(jié)果也無影響。
2.凝血因子Ⅷ抑制物檢測
(1)原理:將受檢血漿與正常人新鮮血漿等量混合,在37℃中放置一定時間,按一期法測定混合血漿中的FⅧ活性,同時與正常血漿中的FⅧ活性比較。若受檢血漿中存在因子Ⅷ抗體,則正常人血漿的FⅧ活性被抑制或被中和。以Bethesda單位來計(jì)算抑制物的含量,能抑制正常人FⅧ活性50%的因子抗體定為l個Bethesda單位。抑制正常人血漿FⅧ活性50%的受檢血漿最高稀釋倍數(shù)為FⅧ抗體的單位數(shù)。
(2)參考范圍:正常人無FⅧ抑制物。
(3)臨床意義:陽性見于反復(fù)輸血、接受抗血友病球蛋白治療的血友病A患者、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、妊娠、惡性腫瘤、DM、結(jié)節(jié)病等。
?。?)臨床評價:Bethesda法還可用于其他因子如FⅨ、FⅩ、FⅪ等抑制物的評價。本法對同種免疫引起的因子抑制物測定較為敏感,對自身免疫、藥物免疫、腫瘤免疫和自發(fā)性凝血因子抑制物則不敏感。FⅧ抑制物的確定,最終還需進(jìn)行LAC檢測以進(jìn)行排除。