1.樣品的采集和處理

　　血清、肝素鋰抗凝血漿、汗、糞便、尿及胃腸液均可作為測定鈉鉀樣品。血清或血漿可在2～4℃或冰凍保存。鉀測定結果明顯受溶血的干擾，因為紅細胞中鉀比血漿鉀高二十幾倍，故樣品嚴格防止溶血。血漿鉀比血清低0.1～0.7mmol／L，這種差別是由于凝血過程中血小板破裂釋放鉀之故。全血未及時分離或冷藏均可使血鉀上升。采血前患者肌活動，如仰臥、握拳等，可使血鉀上升。

　　采集尿樣時，由于尿液易腐敗、變性，并受飲水和晝夜影響，故應收集24小時尿進行測定，冷藏保存或加防腐劑。

　　2.方法學

　?。?）火焰光度法測定：Na⁺、K⁺測定可采用火焰光度法，火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法，利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時發(fā)射的光譜強度進行含量分析，可檢測血清、尿液、腦脊液及胸腹水的Na⁺和K⁺，該方法屬于經典的標準參考法，優(yōu)點是結果準確可靠，廣為臨床采用。

　　通常采用的定量方法有標準曲線法、標準加入法和內標準法。內標法是標本及標準液采用加進相同濃度的內部標準元素進行測定，一般是加入鋰內標，測定的是鋰／鈉或鋰／鉀電流的比值，而不是單獨的鈉或鉀的電流，這樣，可減小燃氣和火焰溫度波動等因素引起的誤差，因而有較好的準確性。

　?。?）化學測定法：目前Na+和K+的化學測定主要利用復環(huán)王冠化合物如穴冠醚或球冠醚，亦稱為冠醚，均為離子載體進行測定，由于大環(huán)結構內有空穴，分子內部氧原子有未共用電子對可與金屬離子結合，根據空穴大小，可選擇性結合不同直徑的金屬離子，從而可達到測出離子濃度的目的。

　　Cl-的化學測定法：采用Fe存在下，Hg（SCN）₂與Cl^-反應生成與Cl^-等當量的SCN^-，再與鐵結合成Fe（SCN）的紅色化合物，進行比色，定量標本中Cl^-的含量。該法測定時，血清中性因素如F、Br和I也可以起反應；其量很少，故可忽略不計。某些藥物及膽紅素均對其有影響。以上比色法均可在自動生化分析儀進行批量測定，屬臨床常用的一種方法。

　?。?）離子選擇電極法（ISE法）：離子選擇電極是一種電化學傳感器，其結構中有一個對特定離子具有選擇性響應的敏感膜，將離子活度轉換成電位信號，在一定范圍內，其電位與溶液中特定離子活度的對數呈線性關系，通過與已知離子濃度的溶液比較可求得未知溶液的離子活度，按其測定過程又分為直接測定法和間接測定法，目前大部分采用間接測定法，由于間接測定法將待測樣本稀釋后測定，所測離子活度更接近離子濃度。

　　ISE法具有標本用量少，快速準確，操作簡便等優(yōu)點。是目前所有方法中最為簡便準確的方法。缺點：電極具有一定壽命，使用一段時問后，電極會老化。

　?。?）整合滴定法：Cl^-可采用特定的整合劑滴定法進行，Molrr法：以KrCrO^-₄為指示劑，用AgN0₃滴定血清中Cl^-。Sehales法：以二苯卡巴腙作指示劑，用Hg（N0₃）2滴定血清中Cl^-。滴定法需要熟練的操作，終點要準確，盡可能排除主觀因素的干擾，否則誤差很大。

　　血清中過多的膽紅素、血脂及血紅蛋白（溶血）對結果干擾很大。滴定過程中易受多種因素影響、難以得到準確的結果，目前已很少應用。

　?。?）酶法：酶法測定鈉的原理是利用鈉依賴的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（鄰硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解釋放出有色產物鄰硝基酚，在波長420nm處測吸光度變化。

　　酶法測鉀的原理是利用對丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸變?yōu)槿樗嵬瑫r伴有還原型輔酶Ⅰ的消耗，在波長340nm處測NADH的吸光度下降。

　　酶法測氯的原理是利用氯使α-淀粉酶與鈣離子結合變成有活性的形式，然后與α-和β-葡萄糖苷酶共同催化人工合成底物2-氯4-硝基苯酚-口-D麥牙庚糖苷（CNP-G7）使其水解產生2-氯4-硝基苯酚，此產物在波長405nm處有最大吸收，血氯濃度與”淀粉酶活性成正比，同時也與2-氯4-硝基苯酚的生成量成正比。酶法的優(yōu)點是不需特殊儀器，缺點是價格較貴。

　　鉀、鈉的測定方法有：火焰光度法、離子選擇電極法、冠醚法和酶法。

　　氯的測定方法有：離子選擇電極法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和電量分析法（庫侖滴定法）。