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    招生方案

    總蛋白定量測(cè)定

    2010-12-06 16:29 來(lái)源:
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      為幫助大家順利通過(guò)2011檢驗(yàn)技師考試,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了總蛋白定量測(cè)定供大家參考。腦脊液蛋白定量測(cè)定可參照尿液蛋白定量,常用的方法為雙縮脲法和染料結(jié)合法。臨床檢驗(yàn)多采用磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法。

      1、原理

      磺基水楊酸為生物堿試劑,能沉淀蛋白質(zhì),但對(duì)白蛋白的沉淀能力比球蛋白強(qiáng),加適量硫酸鈉后,沉淀白、球蛋白的能力趨于一致,與標(biāo)準(zhǔn)蛋白濁度對(duì)比進(jìn)行定量測(cè)定。

      2、試劑

      磺基水楊酸-硫酸鈉試劑(SS-S)

      磺基水楊酸3.0g

      無(wú)水硫酸鈉7.0g

      蒸餾水加至100ml

      過(guò)濾后,儲(chǔ)存于棕色瓶中,如顯色或混濁則不能用。

      3、方法

      (1)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀釋混合人血清標(biāo)準(zhǔn)系列各0.5ml,加SS-S試劑4.5ml,充分混勻,7~15分鐘后,用420nm波長(zhǎng)比濁,以吸光度為縱坐標(biāo),蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      (2)樣品檢測(cè)取待測(cè)腦脊液標(biāo)本各0.5ml于兩只試管中,其中一只試

      管加SS-S試劑4.5ml,另一試管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作為標(biāo)本空白管。在與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的條件下比濁,所得得吸光度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得蛋白質(zhì)濃度。

      4、注意事項(xiàng)

      (1)腦脊液如有多量細(xì)胞或混濁,應(yīng)先離心以除去。如蛋白質(zhì)濃度過(guò)高,應(yīng)先行用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定。

     ?。?)加入SS-S試劑的操作手法和速度、室溫及比濁前的放置時(shí)間都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。故操作時(shí)應(yīng)注意控制加入試劑的方式和比濁時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)管一致。應(yīng)隨氣溫改變,勤作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      5、正常參考值

      腰穿CSF蛋白含量:0.2~0.4g/L池穿CSF蛋白含量:0.1~0.25g/L

      側(cè)腦室穿刺CSF蛋白含量:0.05~0.15g/L

      腦脊液蛋白質(zhì)含量與年齡成正比,兒童含量較低,成人稍高,老年人又比成年人高。

      6、臨床意義

      腦脊液蛋白質(zhì)含量增高,為血腦屏障被破壞的標(biāo)志。頗受臨床工作者的重視。

      蛋白質(zhì)含量增高常見(jiàn)于下列情況:

     ?。?)中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥。腦部感染時(shí),腦膜和脈絡(luò)叢毛細(xì)血管通透性增加,蛋白質(zhì)分子容易透過(guò),首先是白蛋白增高,隨后是球蛋白和纖維蛋白增高。

     ?。?)神經(jīng)根病變。如急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎(Guillain-Barre綜合征),多數(shù)病例有蛋白質(zhì)增高,而細(xì)胞數(shù)正?;蚪咏?,醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理即蛋白-細(xì)胞分離現(xiàn)象。

     ?。?)椎管內(nèi)梗阻。腦與蛛網(wǎng)膜下腔互不相通,血漿蛋白由脊髓中的靜脈滲出,CSF蛋白質(zhì)含量顯著增高,有時(shí)高達(dá)30~50g/L,這時(shí)CSF變黃,可自行凝固。如脊髓腫瘤、轉(zhuǎn)移癌、粘連性蛛網(wǎng)膜炎等。此外,早產(chǎn)兒CSF蛋白含量可達(dá)2g/L,新生兒為0.8~1.0g/L,出生兩個(gè)月后逐漸降至正常水平。

      含血的CSF蛋白質(zhì)含量增高。為了鑒別原來(lái)有無(wú)蛋白質(zhì)增高,可用每升紅細(xì)胞700×106個(gè)約相當(dāng)增加蛋白質(zhì)量0.01g/L來(lái)推算,用含血CSF的蛋白質(zhì)含量減去含紅細(xì)胞數(shù)折算成的蛋白質(zhì)含量,即為原來(lái)CSF的蛋白質(zhì)含量。

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