酶活性|酶質(zhì)量測(cè)定方法及其評(píng)價(jià)：

1.酶活性測(cè)定方法

（1）按反應(yīng)時(shí)間分類法：20世紀(jì)50年代以前大都使用固定時(shí)間法。這種方法是以酶催化反應(yīng)的平均速度來(lái)計(jì)算酶的活性，現(xiàn)多已不用。50年代中期開(kāi)始采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。這種方法用自動(dòng)生化分析儀上完成，可以測(cè)酶反應(yīng)的初速度，其結(jié)果遠(yuǎn)比固定時(shí)間法準(zhǔn)確，在高濃度標(biāo)本尤為明顯，但本法也受到反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)溫度，試劑等的影響，應(yīng)加以注意。

1）定時(shí)法：通過(guò)測(cè)定酶反應(yīng)開(kāi)始后某一時(shí)間段內(nèi)（t1到t2）產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來(lái)求取酶反應(yīng)初速度的方法，稱為兩點(diǎn)法，其中t1往往取反應(yīng)開(kāi)始的時(shí)間。在酶反應(yīng)一定時(shí)間后，往往通過(guò)加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白沉淀劑等，使反應(yīng)完全停止，所以也叫中止反應(yīng)法。

2）連續(xù)監(jiān)測(cè)法：又稱為動(dòng)力學(xué)法或速率法、連續(xù)反應(yīng)法。在酶反應(yīng)過(guò)程中，用儀器監(jiān)測(cè)某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物濃度隨時(shí)間的變化所發(fā)生的改變，通過(guò)計(jì)算求出酶反應(yīng)初速度。

3）平衡法：通過(guò)測(cè)定酶反應(yīng)開(kāi)始至反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)產(chǎn)物或底物濃度總變化量來(lái)求出酶活力的方法，又叫終點(diǎn)法。

（2）按監(jiān)測(cè)方法分類法：可分為①分光光度法；②旋光法；③熒光法；④電化學(xué)方法；⑤化學(xué)反應(yīng)法；⑥核素測(cè)定法；⑦量熱法。

2.酶質(zhì)量測(cè)定法

隨著免疫技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了利用酶的抗原性，通過(guò)抗原、抗體反應(yīng)來(lái)直接測(cè)定酶的質(zhì)量，直接用質(zhì)量單位ng／ml、μg／L來(lái)表示酶含量的高低。免疫學(xué)方法與測(cè)定活性方法相比，其優(yōu)點(diǎn)是靈敏度和特異性高，不受體液中其他物質(zhì)的影響，特別是抑制劑和激活劑的影響，當(dāng)血液中有酶抑制劑存在，或因基因缺陷，合成了無(wú)活性的酶蛋白時(shí)，可以測(cè)出滅活的酶蛋白量，有利于疾病診斷和科學(xué)研究。如肌酸激酶同酶MB（CKMB）質(zhì)量測(cè)定較活性測(cè)定對(duì)疾病的診斷價(jià)值高。