毒理試驗(yàn)
1、最大耐受量測(cè)定試驗(yàn)
用法用量:每只小鼠按0.4ml/10g灌服25%濃度護(hù)肝片,一日內(nèi)連續(xù)灌服3次,每隔4小時(shí)1次。
結(jié) 果:小鼠一日內(nèi)連續(xù)3次灌服護(hù)肝片,最大耐受量為30g/kg提取物,約相當(dāng)于臨床或成人用量的357倍(成人每次服4片,一日3次,全天總用量為12片,即0.35g×12片=4.2g/成人)。
結(jié) 論:經(jīng)小鼠最大耐受量測(cè)定證明,認(rèn)為護(hù)肝片臨床口服用藥較安全。
2、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)
用法用量:護(hù)肝片高劑量組-大鼠按5g/kg灌服護(hù)肝片(內(nèi)含提取物3.57克);護(hù)肝片低劑量組-大鼠按2g/kg灌服護(hù)肝片(內(nèi)含提取物1.43克)。
結(jié) 果:
1)對(duì)一般情況的影響:試驗(yàn)結(jié)果表明,按上述劑量給藥,連續(xù)60天,大鼠在給藥期間,體重、行為活動(dòng)、飲食均為正常,毛具有光澤,無(wú)稀便等。
2)對(duì)紅細(xì)胞、血紅蛋白的影響:按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天,對(duì)雌雄大鼠的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及血紅蛋白均無(wú)明顯的影響。
3)對(duì)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞的影響:結(jié)果證明,按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天,對(duì)雌雄大鼠的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞均無(wú)明顯的影響。
4)對(duì)肝、腎功能的影響:血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定采用比色法,血清尿素氮的測(cè)定采用二乙酰一肟有顯色法,結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理證明,各給藥組對(duì)大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶均有明顯的降低作用(P<0.05),但各組的值均在大鼠的正常值范圍之內(nèi),各給藥組對(duì)大鼠尿素氮均無(wú)明顯影響。
5)對(duì)血清總蛋白、白蛋白的影響:血清總蛋白的測(cè)定采用雙縮脲法,血清白蛋白測(cè)定采用溴甲酚綠法,結(jié)果證明,按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天,對(duì)雌雄大鼠的血清總蛋白、白蛋白均無(wú)明顯影響。
6)對(duì)重要器官系數(shù)的影響:將各組大鼠處死后,分別稱心、肝、脾、肺、腎及睪丸的重量,并求出每只大鼠的重要器官系數(shù),最后經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,結(jié)果證明,護(hù)肝片按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天,對(duì)雌雄大鼠的重要器官系數(shù)均無(wú)明顯影響。
7)對(duì)重要臟器的病理檢查:將上述各組大鼠取血后,處死,分別取出各重要臟器,取材,進(jìn)行常規(guī)固定、切片、HE染色,在顯微鏡下觀察心、肝、脾、肺、腎、睪丸及卵巢組織是否有病理改變,結(jié)果如下:
心臟:心肌細(xì)胞、心內(nèi)膜、心肌內(nèi)結(jié)締組織和毛細(xì)血管均無(wú)異常改變。
肝臟:肝細(xì)胞、肝小葉及小葉間結(jié)構(gòu)無(wú)異常改變。
脾臟:紅髓、白髓內(nèi)細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)均無(wú)異常改變。
肺臟:各級(jí)支氣管組織和上皮組織均未見(jiàn)異常,肺泡、肺泡囊、肺泡壁亦未見(jiàn)形態(tài)學(xué)改變。
腎臟:腎小球、腎小管及各種小管上皮均未見(jiàn)異常改變。
睪丸:細(xì)精管內(nèi)各級(jí)精母細(xì)胞可見(jiàn),成熟精子細(xì)胞及精子大量存在。
卵巢:組織結(jié)構(gòu)和各種卵泡未見(jiàn)異常改變。
上述結(jié)果證明,護(hù)肝片連續(xù)給大鼠口服,對(duì)重要臟器無(wú)明顯的病理改變。
結(jié) 論:
上述長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,護(hù)肝片按5g/kg(內(nèi)含提取物3.57克),2g/kg(內(nèi)含提取物1.43克)給大鼠連續(xù)灌服60天,對(duì)大鼠體重、紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、白細(xì)胞分類均無(wú)明顯影響;對(duì)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、總蛋白、白蛋白、重要器官系數(shù)均無(wú)明顯改變;對(duì)重要臟器心、肝、脾、肺、腎、睪丸、卵巢經(jīng)鏡下觀察無(wú)病理改變。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,認(rèn)為該藥口服用藥無(wú)明顯的毒性反應(yīng)。