1.紅細胞的計數(shù)、分類及其功能的研究
(1)循環(huán)的紅細胞總量的測定:
生物素—逆轉(zhuǎn)抗生物素蛋白—FITC系統(tǒng)的特異性和流式細胞儀(FCM)的敏感性結(jié)合起來,建立了FCM測定人紅細胞總量的方法,此方法具有標本用量少,無放射性的優(yōu)點,適用于兒童和孕婦測定循環(huán)紅細胞總量醫(yī)`學教育網(wǎng)搜集整理。
(2)網(wǎng)織紅細胞總數(shù):
外周血網(wǎng)織紅細胞計數(shù)(百分數(shù)和絕對值)是一反映骨髓紅系增生活性的常用指標。許多學者先后提出應(yīng)用FCM和不同的RNA特異性熒光染料自動計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的方法,如派若寧Y、AO、溴化乙啶、thiazoleorange等。
目前最普遍應(yīng)用的是thiazoieorange染色法,這種特異性RNA的激發(fā)波(488nm)測量的特點,與人工計數(shù)法相比,它不但能得到網(wǎng)織紅細胞的百分數(shù)和絕對值,而且還能獲得網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)(RMI)。RMI是一個檢測骨髓功能的獨立實驗室指標,它與網(wǎng)織紅細胞內(nèi)RNA含量成正比,RMI可成功地用于評價骨髓移植的效果。
目前,F(xiàn)CM檢測網(wǎng)織紅細胞主要用于
1)預(yù)測骨髓移植的效果;
2)解釋各種紅系增長低下性貧血的發(fā)病原因;
3)評價某些新的重組生物制劑的治療效果。
2.白細胞計數(shù)、分類及其功能的研究
(1)白細胞計數(shù)和分類
FCM方法避免常規(guī)染色過程中,由于細胞漂洗和分類溶解所致的人工假象,提供了可靠的評價血液狀態(tài)的第一手資料,并進一步篩選細胞亞群、測定其他參數(shù)。LDS-751、CD45、thiazoleorange
(2)中性粒細胞的功能
FCM可在單個細胞水平上定量測定中性粒細胞的功能變化,有助于了解白細胞在感染性疾病、自身免疫性疾病、惡性疾病的作用和診斷意義。
(3)血小板功能的研究:
FCM可檢測血小板膜抗原,如CD41a、CD42b、CD36、CD62p、CD63等。應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測這些單克隆抗體的變化可用于:
a、評價血小板功能狀態(tài);
b、探測循環(huán)血液中激活的血小板;
c、探測血小板自身抗體。
如對原發(fā)性血小板減少性紫癜、慢粒急變和再障病人的血小板自身抗體的檢測中發(fā)現(xiàn),病人均可探測到IgM型自身抗體,有的病人可同時伴有IgM或IgA自身抗體,后者血小板減少更明顯。因此,IgG血小板免疫熒光檢查是檢測自身免疫反應(yīng)的敏感和特異指標,它可直接測定自身免疫性血小板減少病人的血小板表面免疫球蛋白,進行血小板交叉配型,以此為有自身免疫反應(yīng)的病人選擇合適的供血者。