酶聯(lián)免疫分析法是臨床檢驗(yàn)技師考試中可能涉及的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了酶聯(lián)免疫分析法的具體內(nèi)容，以便大家及時(shí)掌握！

酶聯(lián)免疫分析法（enzyme immunoassay，EIA）是當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的免疫檢測方法。本法將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶對底物高效催化作用結(jié)合起來，根據(jù)酶作用底物后顯色，以顏色變化判斷試驗(yàn)結(jié)果，可經(jīng)酶標(biāo)測定儀作定量分析，敏感度可達(dá)ng水平。常用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase）、堿性磷酶（alkaline phosphatase）等。它們與抗體結(jié)合不影響抗體活性。這些酶具有一定的穩(wěn)定性，制成酶標(biāo)抗體可保存較長時(shí)間。目前常用的方法有酶標(biāo)免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。前者測定細(xì)胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原；后者主要測定可溶性抗原或抗體。本法既沒有放射性污染又不需昂貴的測試儀器，所以較放射免疫分析法更易推廣。

（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）：是與上述固相RIA相似的原理，將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進(jìn)行政區(qū)。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。

（2）夾心法（sandwichassay）：將已知的特異抗體包裝在固相載體（塑料板凹孔或紙片上），加入待檢標(biāo)本，標(biāo)本中的抗原即可與載體上的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的材料后加入該抗原的酶標(biāo)記抗體，洗去未結(jié)合的酶標(biāo)抗體，加底物顯色，用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度，可定量測定抗原。

間接法（indirecr ELISA）常用于檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體，加入待檢標(biāo)本（可能含有相應(yīng)抗體），再加入酶標(biāo)抗Ig的抗全（即第二抗體），經(jīng)加底物顯色后，根據(jù)顏色的光密度計(jì)算出標(biāo)本中抗體的含量。

（3）BAS-ELISA：近年來對酶免設(shè)分析法的改進(jìn)是使用生物素-親合素-過氧化物酶復(fù)合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進(jìn)一步提高檢測的敏感度。可用來檢測多種抗原抗體系統(tǒng)如細(xì)菌、病毒、腫瘤細(xì)胞表面抗原等。一個(gè)親合素（avidin）分子可以結(jié)合4個(gè)生物素分子（biotin）。結(jié)合非常穩(wěn)定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結(jié)合，而不影響后者的生物活性。一個(gè)抗體分子可偶聯(lián)90個(gè)生物素分子，通過生物素又可連接多個(gè)親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應(yīng)用生物-酶標(biāo)親合素系統(tǒng)（biotinavidin system- ELISA，BAS-ELISA），它是通過生物素標(biāo)記抗體連接免疫反應(yīng)系統(tǒng)，同時(shí)借助生物素化酶或酶標(biāo)親合素引入酶與底物反應(yīng)系統(tǒng)。

免疫學(xué)測定方法敏感性比較