精子與卵結(jié)合除精子濃度和數(shù)量因素外，還必須具備妝好的運動功能和對宮頸粘液、卵細(xì)胞放射冠、透明帶及卵細(xì)胞膜的穿透力。精子穿透力是評價精子功能的主要指標(biāo)之一，據(jù)報告，約18%精液常規(guī)檢查正常的精子不能穿透宮頸粘液，所以檢查精子功能對研究精子在體內(nèi)運行，受精能力發(fā)及男性不育的原因有重要價值，其常用的試驗有：

1、體內(nèi)穿透試驗：（in vivo penetration test）又稱性交后試驗。檢查于排卵期性交后一定時間內(nèi)宮頸中粘液活精子數(shù)量，存活率及活運動力，以評價精子對宮頸粘液的穿透能力，正常人可見>50個HPF有正?；顒幽芰Φ木?。當(dāng)宮頸粘液異?；蛴锌咕涌贵w時，精子體內(nèi)穿透能力減弱或喪失。其結(jié)果還受雌激素分泌狀況等多種因素影響。

2、體外穿透試驗（in vitro，penetration test）

（1）簡化玻片試驗：將一滴宮頸粘液置載正玻片上，用蓋玻片鋪平，兩片之間的厚度用哇化的玻璃珠控制，在載玻片兩側(cè)各滴一滴精液，使懷蓋玻片邊緣接觸，借毛細(xì)作用將精液移向蓋玻片，使宮頸粘液與精液之間現(xiàn)一清晰接觸界面，37攝氏度卵育30分鐘。精子在接觸界面處形成一指狀突起伸入粘液，精子穿過指狀突起進(jìn)入精液，然后呈扇形散開運動。本試驗的觀察指標(biāo)為：①粗精了子穿透并有90%以上具有明確直線運動的活動精子時為正常結(jié)果；②精子穿透粘液，但離開粘液與沮液接觸面<500μm為較差；③精子穿透粘液，但很快失活或僅作擺動力為異常；④精子未穿透與精液的接觸界面，精子接觸界面的精液側(cè)凝集為異常結(jié)果。

本試驗常帶來有一定的主觀性，因為在平面玻璃上使精液粘液觸界面的大小和形狀完全標(biāo)準(zhǔn)化是不可能和，因為而吸能定性評價精子粘液的相互作用。

（2）精子宮頸粘液接觸（sperm-cervical mucus contact，SCMC）試驗：本試驗的目的是檢驗精液和燥頸內(nèi)是否存在損害精子運動功能的ASAB及其損害程度，精子與近排卵期的宮頸粘液等量混合，富強(qiáng)溫下作用30min，鏡下計數(shù)擺動的精子，求出擺動精子的出現(xiàn)率（%），以單獨的精液滴鏡檢作為精子活力的對照，擺動精子的出現(xiàn)率越高，意味著精子不能穿過宮頸粘液。說吸ASAB對精子運動功能的損害越重，見表11-1.

表11-1 ASAB對精子運動功能損害

玻片試驗與SCMC試驗陽性者可用其它供者的精液或燥頸粘液分別進(jìn)行交叉試驗，以利于判斷ASAB的來源是清液或燥頸粘液。

（3）無透明帶倉鼠卵-精子穿透試驗（Zone free hamstar egg sperm penetration test，ZFHESPT）簡稱精子倉鼠卵穿透試驗是一種極為嚴(yán)格的生物學(xué)試驗，技術(shù)復(fù)雜，影響因素多。若能加強(qiáng)質(zhì)量控制，再加上其它客觀檢查如精子活力等，可作為測定功能和基礎(chǔ)。

其方法將精子于BWW培養(yǎng)液中經(jīng)37攝氏度獲能，再與用胰蛋白酶外理去除透明帶的倉鼠混合繼續(xù)孵育完成受精過種程。然后以相差顯微鏡檢查，計數(shù)卵子受精率和受精指數(shù)。

受精率（%）=受精卵數(shù)/卵細(xì)胞總數(shù)×100%

由于卵細(xì)胞已去除透明帶一個卵細(xì)胞可被多個精子穿透。FI為穿透卵細(xì)胞的精子總數(shù)與卵細(xì)胞總數(shù)之比，從整體上反映精子穿透力與項體反應(yīng)。FI越高說明精子受精能力越強(qiáng)。