凝集反應是臨床檢驗技師考試中可能涉及的知識點,醫(yī)學教育網整理了相關知識,以便大家及時掌握!
凝集反應
1、凝集反應的原理及特點;
定義:細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應抗體結合后,可出現肉眼可見的凝集現象。
概念:顆粒性抗原+相應抗體↓(適量電解質)凝集現象,可溶性抗原(或抗體)+載體顆粒↓ 致敏顆粒+相應抗體(或抗原)↓(適量電解質)凝集現象。
特點:1.抗原為顆粒性抗原或可溶性抗原致敏顆粒;2.反應時間較短,需幾到十幾分鐘;3.反應產物為凝集塊;4.凝集反應抗原分子大,反應面積小,為使抗體分子不致過多,試驗時需稀釋抗體。
2 、常見的直接凝集反應:
直接凝集試驗:顆粒性抗原在有電解質的參與下,直接與相應抗體結合出現的凝集現象。
凝集原(agglutinogen):凝集反應中的抗原
凝集素(agglutinin):凝集參與反應的抗體
分類:玻片凝集實驗(將已知抗體與待測顆??乖苯拥蛢r在玻片上,混勻并在室溫下反應數分鐘,用肉眼或低倍鏡觀察有無凝集現象,出現顆粒凝集的為陽性反應。方法評價:簡便、快速;定性檢測方法;但敏感性較低。臨床應用:主要用于菌種鑒定和血清學分型,也可檢測病人血清中有無相應的抗體;用于人類ABO血型鑒定。),試管凝集實驗(顆粒性抗原(如細菌或紅細胞等)與相應抗體在試管中直接結合,在一定條件下,出現肉眼可見的凝集現象。方法評價:經典的半定量試驗;敏感性不高;干擾因素多,影響特異性;操作較簡單。臨床應用:用已知抗原測定血清中有無相應抗體及其含量,輔助臨床診斷疾病或流行病學調查。如外斐試驗、肥達試驗、交叉配血試驗。)
3 、間接凝集反應的分類及常見試驗。
間接凝集試驗:將可溶性抗原(或抗體)吸附或偶聯(lián)于載體上,使之成為致敏載體顆粒,再與相應抗體(或抗原)作用,在適宜電解質的參與下,出現的凝集現象。
載體(carrier):試驗體系中與免疫無關的顆粒。
致敏:抗原(或抗體)偶聯(lián)于顆粒表面的過程。
致敏顆粒(sensitized particle): 吸附有已知抗原或抗體的顆粒。
(正向間接凝集反應:用抗原致敏載體,檢測標本中有無相應抗體。先將可溶性抗原結合與載體顆粒,然后與待測標本中的抗體反應,出現肉眼可見凝集顆粒或塊。反向簡潔凝集反應:用特異性抗體致敏載體,檢測標本中有無相應抗原。簡潔凝集抑制反應:用抗原致敏載體,聯(lián)合相應抗體檢測標本中是否存在于致敏抗原相同的抗原。
協(xié)同凝集反應:金黃色葡萄球菌的細胞壁中含有A蛋白(staphylococcus protein A,SPA),SPA具有與IgG的Fc段結合的特性,利用該特性與IgG抗體相連制成抗體致敏的顆粒載體,當它與相應抗原反應時出現的凝集現象即叫協(xié)同凝集試驗。
類風濕因子檢測:
原理::類風濕因子( rheumatoid factor RF)是由于細菌、病毒等感染因子,引起體內產生的以變性IgG(一種抗體)為抗原的一種自身抗體。IgM型為主要類型。
IgG吸附于聚苯乙烯膠乳顆粒上作為檢測試劑,在反應介質中,待檢血清中如含有RF,可與膠乳顆粒出現凝集反應。醫(yī)學教育網|搜集整理
操作步驟::在3塊載玻片上分別加一滴RF陽性血清、RF陰性血清及待檢血清;加一滴IgG致敏的膠乳于各血清樣品中,輕微晃動載玻片混勻。1min 后觀察凝集反應發(fā)生情況。
注意事項:器材要潔凈、血清要新鮮、以確保結果可靠。注意陰性、陽性對照的設立。注意血清及致敏膠乳加樣量的比例。
紅細胞為載體:間接血凝試驗(可溶性抗原吸附于人O型紅細胞或綿羊、家兔紅細胞上,制備成抗原致敏的紅細胞,然后與相應抗體作用,在有電解質存在的條件下,作用一定時間后可出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。方法評價:敏感性高于直接凝集試驗和膠乳凝集試驗;操作簡便易行、快速、成本低廉。)
聚苯乙烯膠乳微粒為載體:膠乳凝集試驗
間接凝集反應特點:敏感、快速、操作簡便、不需特殊儀器;檢測范圍廣(各種抗體和可溶性抗原)。敏感性比直接凝集反應高。
間接凝集反應應用:抗原的檢測:抗體的檢測:感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應性疾病。