參加2019年臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試的考生，有很多人不了解瑞特染色法，下面是小編為大家整理的一些內(nèi)容，希望所有考生都能夠順通過(guò)！

酸性染料:伊紅;堿性染料:亞甲藍(lán)。

甲醇:染料溶劑。

(1)瑞特染料是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍(lán)組成有復(fù)合染料。亞甲藍(lán)為四甲基硫堇染料，有對(duì)醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽，即氯化美藍(lán)。美藍(lán)容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級(jí)染料。市售美藍(lán)中部分已被氧化為天青。伊紅通常為鈉鹽。即伊紅和伊混合后，產(chǎn)生一種憎液性膠體伊紅美藍(lán)中性沉淀，即瑞特染料。

(2)細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用，各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)各種染料的親和力也不一樣。因此，用本染料液染色后，在同一血片上，可以看到各種不同的色彩，例如血紅蛋白，嗜酸性顆粒是堿性蛋白質(zhì)，和酸性染料伊紅結(jié)果，染粉紅色，稱之為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白與淋巴細(xì)胞 胞漿是酸性，和堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合，染紫藍(lán)色，稱之為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)和伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合，染淡紫色，稱之為中性物質(zhì)。

(3)PH對(duì)細(xì)胞染色有影響。細(xì)胞各種成分均不蛋白質(zhì)，由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì)，所帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環(huán)境中下在電荷增多，易與伊紅結(jié)合，染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負(fù)電荷增多，易與美藍(lán)或天青結(jié)合，染色 偏藍(lán)。因此細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感，染色用正經(jīng)片必須清潔，無(wú)酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇，稀釋染色必須用緩沖液，沖洗用水應(yīng)近中性，否則可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常，以致識(shí)別困難，甚至造成錯(cuò)誤。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫或是37℃下貯存一定時(shí)間，待染料成熟，主要是美藍(lán)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樘烨郆后才能使用，貯存時(shí)愈久，染色效果愈好。EAM GILLILAND等采用吸光度比值作為頊特染液的質(zhì)量規(guī)格。

rA測(cè)定方法如下:取瑞特染液15-25μl(視染液濃度而定)，加甲醇10ml稀釋，混勻后以甲醇為空折管，分別以波長(zhǎng)650nm和25nm比色。Ra=a650/a525.因?yàn)槊浪{(lán)吸收峰小組長(zhǎng)為650nm，伊紅吸收峰波長(zhǎng)為525nm ;天青B吸收峰也為650nm但吸光度A約為美藍(lán)的一半。所以新配染料rA接近2，隨著美藍(lán)逐漸氧化為天青B，RA也相應(yīng)下降。RA下降到1.3±0.1時(shí)即可使用。瑞特染液貯存過(guò)程中，必須塞嚴(yán)，以防止甲醇揮發(fā)和被氧化成甲酸。有人主張?jiān)谂浞街屑尤敫视?0ml，防止甲醇揮發(fā)，關(guān)可合細(xì)胞染色清晰。甲醇必須純凈，如甲醇中丙酮含量過(guò)多，染色偏酸，使白細(xì)胞著色不良。

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