抗原抗體反應(yīng)是檢驗(yàn)技士考試科目中臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)中的重點(diǎn)內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編今天領(lǐng)大家一起來(lái)看看網(wǎng)校老師是如何講解這章節(jié)的重點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)的。
「抗原抗體反應(yīng)」
第一節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的原理
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇(表位)和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性,這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。
除兩者分子構(gòu)型高度互補(bǔ)外,抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸,才有足夠的結(jié)合力。
一、抗原抗體結(jié)合力抗原抗體是一種非共價(jià)結(jié)合,不形成共價(jià)鍵。
1.靜電引力(庫(kù)倫引力):是因抗原、抗體帶有相反電荷的氨基與羧基基團(tuán)間相互吸引的能力,這種吸引力的大小和兩個(gè)電荷間的距離平方成反比。兩個(gè)電荷距離越近,靜電引力越大。
2.范德華力:這是原子與原子、分子與分子相互接近時(shí)分子極化作用發(fā)生的一種吸引力,是抗原、抗體兩個(gè)大分子外層軌道上電子相互作用時(shí),兩者電子云中的偶極擺動(dòng)而產(chǎn)生的引力。這種引力的能量小于靜電引力。
3.氫鍵結(jié)合力:是供氫體上的氫原子與受氫體上氫原子間的引力。其結(jié)合力較強(qiáng)于范德華引力。
4.疏水作用:最強(qiáng)。水溶液中兩個(gè)疏水基團(tuán)相互接觸,由于對(duì)水分子的排斥而趨向聚集的力。
二、抗原抗體的親和性和親合力親和性指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原表位之間相適應(yīng)而存在的引力,它是抗原抗體間固有的結(jié)合力。親和性用平衡常數(shù)K來(lái)表示,K值越大,親和性越強(qiáng),與抗原結(jié)合也越牢固。
抗體的親合力指抗體結(jié)合部位與抗原表位間結(jié)合的強(qiáng)度,與抗體結(jié)合價(jià)、抗體的親和性、抗原有效表位數(shù)目等相關(guān)。
三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗體和大多數(shù)的抗原同屬蛋白質(zhì),在通常的血清學(xué)反應(yīng)條件下帶有負(fù)電荷,形成水化層,成為新水膠體,因此,蛋白質(zhì)分子不會(huì)相互凝集或沉淀。
當(dāng)抗原與抗體結(jié)合,使其表面電荷減少,水化層變薄,失去親水性能,抗原抗體復(fù)合物成為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下,膠體粒子表面的電荷被中和,使疏水膠體進(jìn)一步靠攏,形成可見(jiàn)的抗原抗體復(fù)合物。
第二節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)
一、特異性抗原表位與抗體超變區(qū)結(jié)合的特異性,是兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系所決定的。這一特性,是應(yīng)用于臨床診斷的基礎(chǔ)。
但某些天然抗原具有多種抗原表位,與另一物質(zhì)可能有共同抗原表位,對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
二、可逆性抗原抗體是非共價(jià)結(jié)合,故不牢固,是一種動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程。抗原抗體的親合力及反應(yīng)條件(如離子強(qiáng)度、pH等)可影響解離。
親和層析法就是利用這個(gè)原理來(lái)純化抗原或抗體。
三、比例性抗原抗體比例合適時(shí),沉淀物形成快而多,稱為抗原抗體反應(yīng)的等價(jià)帶;若抗原或抗體極度過(guò)剩則無(wú)沉淀形成,稱為帶現(xiàn)象,抗體過(guò)量時(shí),稱為前帶,抗原過(guò)量時(shí),稱為后帶。
四、階段性抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段。
第一階段:抗原與抗體特異性結(jié)合階段,此階段僅需幾秒至幾分鐘,但不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。
第二階段:可見(jiàn)反應(yīng)階段,此階段需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。
反應(yīng)過(guò)程受到反應(yīng)條件(如溫度、pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等)的影響。
第三節(jié) 影響抗原抗體反應(yīng)的因素
一、反應(yīng)物自身因素
1.抗體:濃度、特異性、親和性和等價(jià)帶的寬窄都影響抗原抗體反應(yīng)。
應(yīng)選擇高特異性、高親合力的抗體作為診斷試劑。但單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng)。
2.抗原:理化性狀、分子量、抗原表位的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果。
顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。
二、環(huán)境因素
1.電解質(zhì):抗原抗體反應(yīng)時(shí)常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
2.酸堿度:抗原抗體反應(yīng)一般在pH6~9之間進(jìn)行。
3.溫度:一般為15~40℃,常用反應(yīng)溫度為37℃,如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體解離,甚至變性或破壞。
4.振蕩:適當(dāng)振蕩也可加速反應(yīng)。
第四節(jié) 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型
免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。
早期包括:凝集現(xiàn)象、沉淀現(xiàn)象、溶血現(xiàn)象等。
免疫組織化學(xué)技術(shù)、免疫測(cè)定、放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)和金免疫技術(shù)等。
還有一組小測(cè)試,來(lái)試試自己掌握了多少吧!
1. 抗原抗體反應(yīng)不包括
A.特異性
B.比例性
C.可逆性
D.多價(jià)性
E.電離性
2. 可以用已知抗原或抗體檢測(cè)相應(yīng)的抗體或抗原,是由于抗原抗體反應(yīng)的
A.特異性
B.比例性
C.可逆性
D.多價(jià)性
E.電離性
3. 抗原抗體反應(yīng)需要合適的溫度才有利于二者結(jié)合,其范圍一般為
A.4~10℃
B.11~15℃
C.16~20℃
D.15~40℃
E.41~50℃
4.不是影響抗原抗體反應(yīng)的因素是
A.溫度
B.電解質(zhì)
C.pH
D.適當(dāng)振蕩
E.隔絕空氣
5.不屬于抗原抗體反應(yīng)的是
A.PCR技術(shù)
B.免疫電泳技術(shù)
C.酶聯(lián)免疫技術(shù)
D.免疫比濁技術(shù)
E.放射免疫技術(shù)
答案:EADEA
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