糖化血紅蛋白測定中的常用檢測方法是醫(yī)學檢驗主管技師考試可能涉及到的知識點，醫(yī)學教育網(wǎng)小編整理了相關知識點，供考生參考。

離子交換色譜法（HPLC、LPLC）：基于電荷差異進行分析。葡萄糖與血紅蛋白（Hb）的β鏈N末端纈氨酸（Val）結合降低了等電點，導致糖化Hb帶的正電荷比未糖化Hb的少，與樹脂的附著力小，可以分別用不同的離子濃度的緩沖液在不同的時間將Hb從陽離子交換柱中洗脫下來，再根據(jù)每個峰值下的面積來計算HbA1c占總Hb的比例。

精密度高，有些產(chǎn)品CV可以小于1%

非特異性問題存在，有些產(chǎn)品仍會受變異Hb 、氨基甲酰化和乙?；疕b影響

可采用高通量的高效液相色譜（HPLC）和低壓系統(tǒng)（LPLC）方法

美國糖化血紅蛋白標準化計劃（NGSP）的參考方法

電泳法（Elec）：研制于上世紀80年代，與離子交換層析法一樣也是基于糖化和非糖化Hb所帶的電荷不同進行分離。該方法操作簡易，不受溫度、pH影響，在當時相對其他方法來說精密度較高，但是需成批樣本分析，分析時間較長，臨床上現(xiàn)已較少使用。

親和色譜法（HPLC-af chr）：基于結構不同進行分析。利用對m-氨苯基硼酸依賴的糖化血紅蛋白1，2-順式二醇基團和固定的硼酸陰離子的特殊反應而設計的。與Hbα和β鏈的纈氨酸（Val）和賴氨酸（？-Lys）連接的葡萄糖均會與硼酸結合形成可逆的復合物，未糖化Hb先被洗脫后，再用山梨醇分離復合物，并將全部糖化Hb洗脫出來。

檢測結果是“總”糖化Hb，通過校準其結果與HPLC有良好的相關性

不受溫度、尿毒癥、HbF或Schiff base的干擾

室內精密度較高，實驗室間的結果存在差異

免疫法（Im tur）：抗原抗體反應原理。單克隆抗體技術的運用使該方法有了快速發(fā)展，最早是英國Dako公司研制出識別葡萄糖附著在Hb的β鏈N末端8個氨基酸抗原位點的單克隆抗體，用酶免疫原理（EIA）進行檢測。

具有較好的精密度、與其他方法有較好的相關性

可以在自動生化儀上用比濁法進行定量測定

抗原與IFCC一級參考物質β鏈N末端6個氨基酸肽端相似

如果用6個氨基酸的為抗原，當Hb發(fā)生第6位氨基酸變異[HbS（β6glu→val）和HbC（β6glu→lys）]時將不會被識別，可導致廠家間的檢測結果存在著偏倚

各廠家產(chǎn)品的單抗針對的抗原決定簇不同、親和力不同等因素也會影響結果的可比性

酶法（En）：近幾年才推出在自動生化儀上測定的生化反應方法。其原理是在蛋白酶的作用下，切斷HbA1c的？鏈N末端的糖化二肽，糖化二肽在果糖基肽氧化酶的作用下生成過氧化氫，在過氧化物酶的存在下與顯色劑產(chǎn)生顯色反應，通過測定吸光度求出HbA1c的百分濃度。該方法精密度好，同HPLC和免疫法均有較好的相關性。

快速檢驗（POCT：Mic chr、Flu im）