溶血反應檢測是臨床醫(yī)學檢驗主管技師考試復習需要了解的知識，醫(yī)學|教育網(wǎng)整理相關知識如下：

（一）補體

檢測血清補體水平或補體活性時需要從受檢者采血及分離血清。做補體結合試驗時多采用豚鼠血清作為實驗用補體的來源。因為補體在體外極易衰變，所以檢測補體活性的血清標本和作為補體試劑的血清必須新鮮。

受檢者一般做靜脈采血，在動物可做心臟采血。血清分離后應及時使用，最好在當日用完。必須保存時采用小量分裝的辦法，置－70℃下可保存數(shù)月，避免反復凍融。凍干制品可長期保存，但其活性都不同程度地比新鮮血清降低。

以豚鼠血清作補體來源時，應考慮到個體差異。為了確保血清中補體的有效活性，必須取3只以上豚鼠的血清混合后使用。

（二）綿羊紅細胞

從綿羊頸靜脈無菌采血，抽出血液后立即小心地注入放有玻璃珠的無菌干燥三角燒瓶中，充分旋搖15～20min，以除去纖維蛋白。也可將羊血與等量或2倍量的Alsever血液保存液混合，既有抗凝作用，又適于儲存；分裝后置4℃，可使用3周。

實驗前，取適量抗凝血，加入8～10倍的生理鹽水，輕輕混勻后2000r/min離心5min；棄上清，沉淀的紅細胞用生理鹽水再洗一次，這時上清為無色澄清，如顯紅色說明有溶血現(xiàn)象，應更換新鮮羊血；第三次用緩沖液洗滌，棄上清，取壓積紅細胞用緩沖液配制SRBC懸液，使用濃度一般為2％～5％。為使紅細胞濃度標準化，可吸取少量紅細胞懸液，中入20～30倍的稀釋液中，在542nm波長比濁，以吸光度為標準調整紅細胞濃度。

（三）溶血素

溶血素即抗綿羊紅細胞抗體，多是以綿羊紅細胞免疫家兔而得到兔抗血清。一般沒有必要進一步提純抗體，但在試驗前需先進行加熱56℃30min或60℃3min以滅活補體。

由于補體溶血試驗及補體結合試驗均是比較精密的試驗，其結果與溶血素的效價有關，所以試驗需要滴定溶血素效價；在制備抗血清的過程中，于動物采血前和分離抗血清后也需要滴定溶血素效價。

（四）稀釋緩沖液

磷酸緩沖液或巴比妥緩沖液等均可用于溶血試驗，pH值應調至7.2～7.4之間。另加入適量氯化鈉以保持等滲，并適當?shù)丶尤胍恍┾}離子和鎂離子，這是補體活化所不可缺少的。有的配方還加入0.1％的明膠以使蛋白溶液穩(wěn)定；加入0.01％NaN3可以防腐，利于較長時間保存。