【關(guān)鍵詞】  透明質(zhì)酸；激活素A；腫瘤壞死因子-α；肝纖維化

　　摘要  目的：研究慢性乙肝（CHB）患者血清透明質(zhì)酸（HA）、激活素A（ACTA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量與肝組織炎癥活動(dòng)及纖維化程度的關(guān)系。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和放射免疫吸附試驗(yàn)（RIA）測(cè)定96例慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量，同時(shí)進(jìn)行肝組織活檢，對(duì)肝組織進(jìn)行炎癥分級(jí)及纖維化分期，分析以上三項(xiàng)指標(biāo)與肝組織病理變化的關(guān)系。結(jié)果：慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量與慢性乙肝發(fā)展階段性相一致，在慢性乙肝重度與肝硬化（LC）階段達(dá)最高水平。與肝組織炎癥及纖維化程度一致，在纖維化分期S4處于最高水平。結(jié)論：血清HA、ACTA、TNF-α與肝纖維化的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，檢測(cè)血清以上三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)于肝纖維化動(dòng)態(tài)觀察、早期診斷及預(yù)后評(píng)估具有一定的理論和臨床價(jià)值。

　　關(guān)鍵詞  透明質(zhì)酸；激活素A；腫瘤壞死因子-α；肝纖維化

　　Relationship between the Level of Serum HA，ACTA，TNF-α and the Pathological Changes of the Liver Tissue in Patients with Chronic Hepatitis

　　YANG Qing， BAI Jing， WANG Xingyun， LIU Zhonghui

　?。═he First Affiliated Hospital，Jilin University， Changchun 130021，China）

　　Abstract  Objective：To study the relationship between the serum hyaluronic acid（HA），activinA （ACTA），tumour necrosis factor-α（TNF-α）and  the inflammatory reaction ，pathological changes of the liver tissue in patients with chronic hepatitis.Methods： the serum HA，ACTA，TNF-αcontent was assayed by Elisa and RIA in 96 cases of chronic  hepatitis B， and liver biopsy，inflammation classification and fibrosis stage division were carried out at the same time ，then the relationship between the three indexes above and the pathological changes of the liver tissue was analysed. Results：The level of the serum HA， ACTA ，TNF-α in patients with chronic hepatitis B was consistent with its development stages， which reached the highest level at the severe stage of chronic hepatitis B and in liver cirrhosis .They were also consistent with the level of liver tissue inflammation and fibrosis，manifesting the highest level in inflammation fobrosis stage S4. Conclusion： The serum HA，ACTA，TNF-αare closely correlate to the pathogenesis of the hepahepatic fibrosis.The three index  above is of some theoretic and clinical significance in the dynamic observation of liver fibrosis，the earlyβdiagnosis， therapy and  the estimate of the prognosis.

　　Key words  Hyaluronic acid；Activin A；Tumour necrosis facor-α；Hepatic fibrosis

　　各種病因所引起的慢性肝病絕大多數(shù)都有肝纖維化，其中25%~40%最終發(fā)展為肝硬化及肝癌，早期診斷及逆轉(zhuǎn)肝纖維化已成為慢性肝病防治研究中的一個(gè)重要課題[1].本研究對(duì)96例慢性乙肝患者進(jìn)行肝組織活檢、檢測(cè)其血清HA、ACTA、TNF-α含量，分析其與肝纖維化的關(guān)系。

　　1  材料與方法

　　1.1  研究對(duì)象  96例慢性乙肝患者均為我院2005年3月至2006年2月住院病人，其中男76例，女20例，年齡18~65歲。診斷均符合2000年西安會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》診斷標(biāo)準(zhǔn)。慢性乙肝輕度30例，中度25例，重度25例，乙肝肝硬化16例。正常對(duì)照組20例，為我院體檢中心健康體檢者。

　　1.2  研究方法  所有樣本為清晨空腹采血3mL，37℃水浴30min，2 000r/min離心15min，吸取血清置-70℃凍存?zhèn)錂z。采用ELISA法測(cè)定血清ACTA、TNF-α含量，試劑由美國(guó)Genzyme公司提供。采用RIA法測(cè)定血清HA水平，試劑盒由北京北方生物技術(shù)公司提供。肝組織病理選用美國(guó)Temno活檢針單操作法取肝組織送病檢，肝組織標(biāo)本采用HE染色。病理分期依據(jù)2000年西安會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》中的關(guān)于肝組織纖維化病理分期的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

　　1.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多個(gè)樣本均數(shù)比較用方差分析。

　　2  結(jié)果

　　2.1  各組慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1.血清HA、ACTA、TNF-α含量在慢性乙肝輕度組即明顯升高，并隨著慢性乙肝的發(fā)展而呈逐漸增高趨勢(shì)，在慢性乙肝重度及肝硬化組達(dá)最高水平，各組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。

　　表1  慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α水平（略）

　　與對(duì)照組比較  *P<0.05，**P0.01

　　2.2  肝組織病理纖維化分期與血清HA、ACTA、TNF-α含量關(guān)系見(jiàn)表2.血清HA、ACTA、TNF-α含量從S1到S4有不同程度升高，其含量在S4達(dá)到最高水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

　　表2  肝組織病理分期與HA、ACTA、TNF-α含量的關(guān)系（略）

　　與S1期比較  *P<0.01

　　3  討論

　　肝纖維化的實(shí)質(zhì)是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）在肝內(nèi)的異常沉積。大量實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)HA是反映肝纖維化程度的可靠指標(biāo)[2-4].ACT屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）超家族，是由兩個(gè)亞單位（βAβB）組成的二聚體糖蛋白，根據(jù)亞單位組成的不同分為ACTA（βAβA）、ACTB（βBβB）、ACTAB（βAβB），其中以ACTA最為重要[5].近年來(lái)研究表明，ACTA是肝臟生長(zhǎng)抑制性遞質(zhì)，抑制肝細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)其凋亡、刺激肝星狀細(xì)胞（HSC）分泌ECM、參與肝纖維化形成[6].黃新等[7]實(shí)驗(yàn)證實(shí)，ACTA能刺激體外培養(yǎng)的HSC分泌ECM，在一定濃度范圍內(nèi)（1~100mg/L）呈劑量依賴性關(guān)系。Welt 等[8]研究發(fā)現(xiàn)，ACTA通過(guò)和其受體結(jié)合抑制肝細(xì)胞DNA的合成，而其拮抗劑可促進(jìn)肝細(xì)胞再生。TNF-α最早被認(rèn)為是單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的炎性細(xì)胞因子，因與腫瘤患者消瘦密切有關(guān)，以前曾被作為惡液質(zhì)（cachexia）因子， TNF-α通過(guò)其胞膜受體TNF-αRⅠ和TNF-αRⅡ發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。既往大量臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，肝炎等肝臟疾病患者肝內(nèi)有大量TNF-α產(chǎn)生并參與肝損傷的病理發(fā)生發(fā)展，與肝炎和肝硬化及肝癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[9].本研究同時(shí)比較肝組織在不同肝纖維化分期血清HA、ACTA、TNF-α含量，結(jié)果顯示：血清HA、ACTA、TNF-α水平隨肝組織纖維化程度加重而升高，在S4處于最高水平，說(shuō)明HA、ACTA、TNF-α水平與肝纖維化程度相關(guān)。與多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道相一致[9-11]. 綜上所述，慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α肝纖維化的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，檢測(cè)患者血清HA、ACTA、TNF-α可以做為反映肝纖維化程度的良好指標(biāo)。

　　參考文獻(xiàn)

　　[1]  程明亮， 楊長(zhǎng)青。肝纖維化的基礎(chǔ)研究與臨床[M].人民衛(wèi)生出生社，2002，35.

　　[2]  李英， 黃華， 柳利民， 等。 慢性肝炎、肝硬化患者血清透明質(zhì)酸、IV型膠原、層粘連蛋白檢測(cè)的臨床意義[J].中華醫(yī)學(xué)實(shí)踐雜志，2005，4（4）：112-114.

　　[3]  燕德起， 張麗， 楊玉然， 等。 肝纖維化指標(biāo)、生長(zhǎng)因子-β1及肝臟CT分型與肝硬化的關(guān)系[J].中華現(xiàn)代中西醫(yī)雜志， 2005，3（11）：186-188.

　　[4]  俞純山。 肝纖維化的檢測(cè)及其臨床意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2000，23（3）：190-192.

　　[5]  Huang X， Li DG， Wang ZR，et al. Expression changes of activin A in the development of hepatic fibrosis， world ［J］ .World JGastroenterol， 2001，7（1）：37-41.

　　[6]  Hughes RD， Evans LW. Activin A and follistatin in acute liver failure［J］。 Eur J Gastroenterol Hepatol， 2003，15（2）：127-131.

　　[7]  黃新，李定國(guó)，陸漢明，等。 激活素和卵泡抑素mRNA在肝纖維化形成過(guò)程中的作用[J].中華肝臟病雜志， 2002，10（2）：85-89.

　　[8]  Welt C， Sidis Y，Keutmann H，et al.Activins，inhibins，and follistatins： from endocrinology to signaling .A paradigm for the new millennium［J］。Exp Biol Med （Mnywood），2002，227（9）： 724-752.

　　[9]  徐學(xué)剛， 張美稀， 董惠芳， 等。 肝病患者血清腫瘤壞死因子-α水平變化[J].世界華人消化雜志， 2003，11（6）：856-858.

　　[10]  Werner S，Alzheimer C.Roles of activin in tissue repair，fibrosis，and inflammatory disease［J］。Cytokine Growth Factor Rev ，2006，17（3）：157-171.

　　[11]  何云，王建賓，王宇明。慢性肝炎肝纖維化程度診斷方法的進(jìn)展［J］。世界華人消化雜志，2001，9（11）：1305-1309.