“生物堿如何提取分離?”是高級(jí)藥物制劑工考試中需要掌握的知識(shí),為幫助大家理解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理內(nèi)容如下:
一、生物堿的提?。?
1.水或酸水提取法
(1)生物堿在植物體內(nèi)都以鹽的形式存在,常以無(wú)機(jī)酸水提取。使生物堿的大分子有機(jī)酸鹽變?yōu)樾》肿訜o(wú)機(jī)酸鹽,增大在水中的溶解度,且方法比較簡(jiǎn)便。
(2)常用0.1%~l%的硫酸、鹽酸或醋酸、酒石酸溶液作為提取溶劑,采用浸漬法或滲漉法提取。
(3)主要缺點(diǎn)是提取液體積較大,濃縮困難,且水溶性雜質(zhì)多。故用酸水提取后,一般可采用下列純化和富集生物堿的方法:
1)陽(yáng)離子樹(shù)脂交換法
生物堿鹽在水中可解離出生物堿陽(yáng)離子,能和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂發(fā)生離子交換反應(yīng),被交換到樹(shù)脂上。交換完全后,用中性水或乙醇洗除柱中的雜質(zhì)。最后,再用適當(dāng)?shù)姆椒ǎㄋ崴蛩嵝砸掖迹⑸飰A從樹(shù)脂上洗脫下來(lái)。
2)萃取法
將酸水提取液堿化,生物堿游離后,如沉淀,過(guò)濾即得;如不沉淀,以適當(dāng)親脂性有機(jī)溶劑萃取,回收溶劑,即得總生物堿。
2.醇類(lèi)溶劑提取法
(1)游離生物堿或其鹽均可溶于甲醇、乙醇,可用醇回流或滲漉、浸漬等方法提取。
(2)優(yōu)點(diǎn):適應(yīng)性廣,不同堿性的生物堿和鹽均可用,提取出來(lái)的水溶性雜質(zhì)較少。缺點(diǎn):脂溶性雜質(zhì)多。
(3)還可配合酸水-堿化-萃取法處理去除脂溶性雜質(zhì)。
具體方法是醇提液回收醇后加稀酸水?dāng)嚢?,濾過(guò),濾液調(diào)堿性后以親脂性有機(jī)溶劑萃取,回收溶劑即得總生物堿。
3.親脂性有機(jī)溶劑提取法
(1)大多數(shù)游離生物堿都是親脂性的,故可用氯仿、苯、乙醚等提取游離生物堿??刹捎媒n、回流或連續(xù)回流法提取。
(2)但一般要將藥材用少量堿水濕潤(rùn)后提取,以便使生物堿游離,也可增加溶劑對(duì)植物細(xì)胞的穿透力。
(3)揮發(fā)性生物堿如麻黃堿可用水蒸氣蒸餾法提取??缮A的生物堿如咖啡堿可用升華法提取。
二、生物堿的分離:
1.利用堿性差異進(jìn)行分離
(1)總堿中各生物堿的堿性不同,可用pH梯度萃取法進(jìn)行分離。
(2)將總生物堿溶于氯仿等親脂性有機(jī)溶劑,以不同酸性緩沖液依pH由高至低依次萃取,生物堿可按堿性由強(qiáng)至弱先后成鹽依次被萃取出而分離,分別堿化后以有機(jī)溶劑萃取即可。
(3)將總生物堿溶于酸水,逐步加堿使pH值由低至高,每調(diào)一次pH值,即用氯仿等有機(jī)溶劑萃取,則各單體生物堿依堿性由弱至強(qiáng)先后成鹽依次被萃取出而分離。
2.利用溶解度差異進(jìn)行分離
(1)游離生物堿:如苦參中苦參堿和氧化苦參堿的分離,可利用氧化苦參堿極性稍大難溶于乙醚,苦參堿可溶于乙醚的性質(zhì),將苦參總堿溶于氯仿,再加入10倍量以上乙醚,氧化苦參堿即可析出沉淀。漢防己中漢防己乙素極性大于甲素,故在冷苯中的溶解度小于甲素,借此可用冷苯法將兩者分離。
(2)生物堿鹽:不同的生物堿與不同酸生成的鹽是溶解度也不同:如麻黃中分離麻黃堿、偽麻黃堿,即利用二者草酸鹽的水溶性不同,提取后經(jīng)處理得到的甲苯溶液,經(jīng)草酸溶液萃取后濃縮,草酸麻黃堿溶解度小而析出結(jié)晶,草酸偽麻黃堿溶解度大而留在母液中。
3.利用特殊官能團(tuán)進(jìn)行分離
(1)酚性或含羧基生物堿在堿性條件下成鹽溶于水,可與一般生物堿分離。
(2)內(nèi)酯或內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的生物堿可在堿性水液中加熱開(kāi)環(huán)生成溶于水的羧酸鹽而與其他生物堿分離,在酸性下又環(huán)合成原生物堿而沉淀。
4.利用色譜法進(jìn)行分離
(1)吸附柱色譜:常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑,有時(shí)也用纖維素、聚酰胺等。
(2)分配柱色譜:對(duì)某些結(jié)構(gòu)特別相近的生物堿,可采用分配色譜法。
(3)其他:高效液相色譜、制備性薄層色譜、干柱色譜、中壓或低壓柱色譜等也常用于分離生物堿。
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