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    醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師:《答疑周刊》2015年08期

    2015-01-09 13:50 來源:
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    醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師:《答疑周刊》2015年08期

    【問題】細(xì)胞內(nèi)膽固醇少了LDL受體會增加,為什么是負(fù)反饋調(diào)節(jié)??

    LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL與LDL受體結(jié)合后,內(nèi)吞入細(xì)胞,經(jīng)溶酶體酶作用,膽固醇酯水解成游離膽固醇。若胞內(nèi)膽固醇濃度升高,可通過:

    ①抑制HMGCoA還原酶,減少自身的膽固醇合成;

    ②抑制LDL-R基因的表達(dá),減少LDL-R的合成,從而減少LDL的攝取;

    ③激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂?;鵆oA膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(ACAT),使游離膽固醇在胞質(zhì)內(nèi)酯化成膽固醇酯貯存,從而控制細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量,使其處于正常動態(tài)平衡狀態(tài)。因此為負(fù)反饋調(diào)節(jié)。

    2免疫印跡法和斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)區(qū)別

    免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),是檢測蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質(zhì)量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。免疫印跡法(immunobiottingtest,IBT)亦稱酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因與Southern早先建立的檢測核酸的印跡方法Southernblot相類似,亦被稱為Western-blot.

    酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(以下簡稱ELISA):是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。

    免疫印跡法和斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)兩者的反應(yīng)原理不同。免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù);而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是雙抗體夾心法。因此兩者還是不同的。

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    【問題】Coombs試驗(yàn)的配血原理是什么?

    凡Coombs試驗(yàn)即抗人球蛋白試驗(yàn),是檢測血液中溫反應(yīng)性抗體的一種方法,也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標(biāo)。溫抗體中50%以上由IgG介導(dǎo),其次為IgM,IgA和C3d等,因此本試驗(yàn)應(yīng)分選各種單克隆抗體同時測定。Coombs試驗(yàn)分為直接試驗(yàn)(直接反應(yīng))和間接試驗(yàn)(間接反應(yīng)):直接試驗(yàn)的目的是檢查紅細(xì)胞表面的不完全抗體;間接試驗(yàn)的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

    (1)直接coombs試驗(yàn)用于檢測已粘附在紅細(xì)胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細(xì)胞充分洗滌后,將抗球蛋白試劑加入已結(jié)合有抗體的受檢紅細(xì)胞懸液中,即可見細(xì)胞凝集??捎貌Fㄗ龆ㄐ栽囼?yàn),也可用試管法或微量法做半定量測定。用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等。

    (2)間接coombs試驗(yàn)用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標(biāo)本加入具有特異抗原的紅細(xì)胞懸液中,如果抗原抗體相應(yīng)則發(fā)生結(jié)合,再加入抗球蛋白抗體,則出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集。本法多用于檢測母體Rh(D)抗體以及因紅細(xì)胞不相容的輸血而產(chǎn)生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補(bǔ)體血清等,分析與紅細(xì)胞表面結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。

    【問題】內(nèi)源性溶血形成的復(fù)合物是FIXa還是FXIa?

    凝血因子特性凝血因子目前包括14個,除FⅢ存在于全身組織中,其余均存在于血漿中。

    根據(jù)理化性質(zhì)分為四組。

    (1)依賴維生素K凝血因子

    包括FⅡ、FⅦ、FⅨ和FⅩ,其共同特點(diǎn)是在各自分子結(jié)構(gòu)的氨基末端含有數(shù)量不等的γ-羧基谷氨酸殘基,在肝臟合成中必須依賴維生素K。依賴維生素K凝血因子(依K因子)通過γ-羧基谷氨酸與Ca2+結(jié)合,再與磷脂結(jié)合,這是依K因子參與凝血反應(yīng)的基礎(chǔ)。

    (2)接觸凝血因子

    包括經(jīng)典FⅫ、FⅪ和激肽系統(tǒng)的激肽釋放酶原(PK)、高分子量激肽原(HMWK)。它們的共同特點(diǎn)是通過接觸反應(yīng)啟動內(nèi)源凝血途徑,并與激肽、纖溶和補(bǔ)體等系統(tǒng)相聯(lián)系。

    (3)對凝血酶敏感的凝血因子:

    包括FⅠ、FⅤ、FⅧ和FⅩⅢ,它們的共同特點(diǎn)是對凝血酶敏感。

    (4)其他因子

    包括FⅢ、FⅣ。正常情況下,F(xiàn)Ⅲ不存在于血液中。FⅣ即Ca2+。凝血機(jī)制

    凝血過程示意圖

    內(nèi)源凝血途徑

    內(nèi)源凝血途徑(intrinsicpathway)是指由FⅫ被激活到FⅨa-Ⅷa-Ca2+-PF3復(fù)合物形成的過程。

    外源凝血途徑

    外源凝血途徑(extrinsicpathway)是指從TF釋放到TF-FⅦa-Ca2+復(fù)合物形成的過程。

    共同凝血途徑。

    【臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)】

    免疫學(xué)技術(shù)中的親和層析法,利用抗原抗體反應(yīng)哪個特點(diǎn)來純化抗原或抗體

    A.比例性

    B.特異性

    C.可逆性

    D.親和力

    E.疏水作用力

    【正確答案】C

    學(xué)員提問:答案是D吧。

    解析:可逆性:可逆性指抗原抗體結(jié)合后形成的,復(fù)合物在一定條件下可發(fā)生解離,恢復(fù)抗原抗體的游離狀態(tài)??乖贵w結(jié)合是分子表面的結(jié)合,猶如酶與底物的結(jié)合,是一種非共價鍵結(jié)合,結(jié)合雖穩(wěn)定但可逆;抗原抗體的結(jié)合是一種動態(tài)平衡過程,抗原抗體復(fù)合物的解離取決于抗體對相應(yīng)抗原的親和力及反應(yīng)條件(如離子強(qiáng)度、pH等)。免疫學(xué)技術(shù)中的親和層析法就是利用這個原理來純化抗原或抗體。因此答案為C。

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    【臨床微生物學(xué)】

    有關(guān)莢膜描述錯誤的是

    A.具有免疫原性,可用于鑒別細(xì)菌

    B.—般在機(jī)體內(nèi)形成

    C.具有抗吞噬作用

    D.可增強(qiáng)細(xì)菌對熱的抵抗力

    E.化學(xué)成分可以是多糖,也可以是多肽等

    【正確答案】D

    學(xué)員提問:細(xì)菌夾膜一般是在機(jī)體內(nèi)形成嗎?不是某些細(xì)菌原來就存在的?

    解答:細(xì)菌一般在機(jī)體內(nèi)和營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中才能形成莢膜。有莢膜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成光滑型(s型)或粘液型(m)菌落,失去莢膜后菌落變?yōu)榇植谛停╮)。莢膜并非細(xì)菌生存所必需,如莢膜丟失,細(xì)菌仍可存活。莢膜除對鑒別細(xì)菌有幫助外,還能保護(hù)細(xì)菌免遭吞噬細(xì)胞的吞噬和消化作用,因而與細(xì)菌的毒力有關(guān)。莢膜抗吞噬的機(jī)理還不十分清楚,可能由于莢膜粘液層比較光滑,不易被吞噬細(xì)胞捕捉之故。莢膜能貯留水分使細(xì)菌能抗干燥,并對其他因子(如溶菌酶、補(bǔ)體、抗體、抗菌藥物等)的侵害有一定抵抗力。

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    【臨床血液學(xué)檢驗(yàn)】

    急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞一般檢測不到下列哪種融合基因

    A.PML-RARα

    B.PLEF-RARα

    C.Bcr/abl

    D.NPM-RARα

    E.以上融合基因都檢測不到

    【正確答案】C

    學(xué)員提問:請解釋一下。

    解答:慢性髓細(xì)胞性白血病(chronicmyeloidleukemia,CML)細(xì)胞有t(9;22)(q34;q11)易位形成的費(fèi)城染色體(Phchromosome)和BCR/ABL融合基因,它們在血液病研究中占有重要地位。在發(fā)現(xiàn)Ph染色體后的30多年里,臨床廣泛用細(xì)胞遺傳學(xué)方法檢測Ph染色體做CML的診斷和療效監(jiān)測。尤其近十余年,分子生物學(xué)方法檢測BCR/ABL融合基因的應(yīng)用逐漸普及。因此急性早幼粒細(xì)胞一般檢測不到Bcr/abl。

    因此答案為C。祝您順利通過考試!

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