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    [生物化學(xué)]雙脫氧末端終止法測(cè)序體系與PCR反應(yīng)體系的主要區(qū)...

    原題:
    [生物化學(xué)]雙脫氧末端終止法測(cè)序體系與PCR反應(yīng)體系的主要區(qū)別是前者含有:?
    選項(xiàng):
    A.模板
    B.引物
    C.DNA聚合酶
    D.ddNTP
    E.緩沖液

    答案:
    D
    解析:

    答復(fù):本題選D。

    一、雙脫氧末端終止法測(cè)序體系

      用一側(cè)引物對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行雙脫氧末端終止法測(cè)序反應(yīng),用一個(gè)ddNTP參入反應(yīng),產(chǎn)生長(zhǎng)短不一的單鏈DNA ,然后進(jìn)行SSCP分析?煞謩e使用兩側(cè)的PCR引物,獲得一端平齊的長(zhǎng)度不等的DNA單鏈。DDF方法克服了SSCP分析時(shí)因DNA長(zhǎng)度影響SSCP顯示的困難,通過(guò)一種雙脫氧核苷酸產(chǎn)生異質(zhì)性的單鏈DNA,使其中長(zhǎng)度合適的DNA片段顯示SSCP改變。

    二、PCR反應(yīng)體系

    標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
       10×擴(kuò)增緩沖液      10ul
       4種dNTP混合物    各200umol/L
       引物           各10~100pmol 
       模板DNA       0.1~2ug 
        Taq DNA聚合酶    2.5u 
       Mg2+         1.5mmol/L
       加雙或三蒸水至     100ul
    PCR反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

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