外周血單個核細胞分離是檢驗主管技師考試要求掌握的內容,醫(yī)學教育網搜集整理相關內容供大家參考。
1.原理:外周血中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)的比重與紅細胞、多核白細胞及血小板不同,介于1.075~1.090之間,紅細胞及粒細胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間。因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細胞按相應密度梯度分布而加以分離。
2.試劑:常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。
?。?)Ficoll分層液法:主要用于分離外周血中單個核細胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層,單個核細胞層,粒細胞層和紅細胞層。
(2)Percoll分層液法:是一種連續(xù)密度梯度離心分離法,其分布由上至下依次為:死細胞層,富含單核細胞組分層,富含淋巴細胞的組分層及紅細胞與粒細胞組分層。