（一）生物素及其活化

　　1.標(biāo)記蛋白質(zhì)氨基的活化生物素：N-羥基丁二酰亞胺酯（BNHS）。

　　2.標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素：酰肼（BHZ）和肼化生物胞素（BCHZ）。

　　3.標(biāo)記蛋白質(zhì)巰基的活化生物素：3-（N-馬來酰亞胺-丙酰）-生物胞素（MPB）。

　　4.標(biāo)記蛋白質(zhì)核酸的活化生物素：常用于標(biāo)記核酸分子的活化生物素有光生物素、生物素脫氧核苷三磷酸、BNHS和BHZ。

　　（二）生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)

　　生物素化蛋白質(zhì)衍生物的特性生物素化蛋白質(zhì)衍生物有兩類：一種是生物素化的大分子生物活性物質(zhì)（如抗原、抗體），另一種是標(biāo)記材料（如酶）結(jié)合生物素后制成的標(biāo)記物。

　　標(biāo)記方法：（1）標(biāo)記抗體、抗原：常用于標(biāo)記抗體的活化生物醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理是BNHS；對(duì)于偏酸性的抗原，標(biāo)記時(shí)多采用BHZ。（2）標(biāo)記酶：以生物素標(biāo)記HRP為例。

　　標(biāo)記注意事項(xiàng)：（1）應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類以及分子的理化性質(zhì)，選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件；（2）標(biāo)記反應(yīng)時(shí)，活化生物素與待標(biāo)記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?；?）為減少空間位阻影響，可在生物素與被標(biāo)記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)；（4）生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后，不影響后者的免疫活性；標(biāo)記酶時(shí)則結(jié)果有不同。