熒光抗體在使用前應(yīng)加以鑒定。鑒定指標(biāo)記包括效價及熒光素與蛋白質(zhì)的結(jié)合比率?？贵w效價可以用瓊脂雙擴散法進(jìn)行滴定，效價大于1：16者較為理想。熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合比率（F/P）的測定和計算的基本方法是：將制備的熒光抗體稀釋至A₂₈₀1≈1.0，分別測讀A₂₈₀ （蛋白質(zhì)特異吸收峰）和標(biāo)記熒光素的特異吸收峰，按公式計算。

　　F/P值越高，說明抗體分子上結(jié)合的熒光素越多，反之則越少。一般用于固定標(biāo)本的熒光抗體以F/P=1.5為宜，用于活細(xì)胞染色的以F/P=2.4為宜。

　　抗體工作濃度的確定方法類似ELISA間接法中酶標(biāo)抗體的滴定。將熒光抗體自1：4～1：256倍比稀釋，對切片標(biāo)本作熒光抗體染色。以能清晰顯示特異熒光、且非特異染色弱的最高稀釋度為熒光抗體工作濃度。

　　熒光抗體的保存應(yīng)注意防止抗體失活和防止熒光猝滅。最好小量分裝，-20℃凍存，這樣就可放置3～4年。在4℃中一般也可存放1～2年。