熒光技術(shù)中有關(guān)的概念和參數(shù)常用的如下:
發(fā)射光譜:指固定激發(fā)波長(zhǎng),在不同波長(zhǎng)下所記錄到的樣品發(fā)射熒光的相對(duì)強(qiáng)度。
激發(fā)光譜:指固定檢測(cè)發(fā)射波長(zhǎng),在不同波長(zhǎng)的激發(fā)光激發(fā)樣品所記錄到的相應(yīng)的熒光發(fā)射強(qiáng)度。
熒光效率:熒光分子不會(huì)將全部吸收的光能都轉(zhuǎn)變成熒光,總或多或少地以其他形式釋放。熒光效率是指熒光分子將吸收的光能轉(zhuǎn)變成熒光的百分率,與發(fā)射熒光光量子的數(shù)值成正比。熒光效率=發(fā)射熒光的光量分子數(shù)(熒光強(qiáng)度)/吸收光的光量子數(shù)(激發(fā)光強(qiáng)度),發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強(qiáng)度,除受激發(fā)光強(qiáng)度影響外,也與激發(fā)光的波長(zhǎng)有關(guān)。各個(gè)熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜(熒光光譜),即在某一特定波長(zhǎng)處有最大吸收峰和最大發(fā)醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理射峰。選擇激發(fā)光波長(zhǎng)最接近于熒光分子的最大吸收峰波長(zhǎng),且測(cè)定光波長(zhǎng)在接近于最大發(fā)射光波峰時(shí),得到的熒光強(qiáng)度也最大。
熒光壽命:指熒光物質(zhì)被一瞬時(shí)光脈沖激發(fā)后產(chǎn)生的熒光隨時(shí)間而衰減到一定程度時(shí)所用的時(shí)間。
熒光的猝滅:指熒光物質(zhì)的熒光輻射醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理能力在受到激發(fā)光較長(zhǎng)時(shí)間照射后會(huì)發(fā)生減弱的現(xiàn)象。這是由于激發(fā)態(tài)分子的電子不能回復(fù)到基態(tài),所吸收的能量無法以熒光的形式發(fā)射。一些化合物有天然的熒光猝滅作用而被用作猝滅劑,以消除不需用的熒光。因此熒光物質(zhì)的保存應(yīng)注意避免光(特別是紫外光)的直接照射和與其他化合物的接觸。
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