許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有:
1.異硫氰酸熒光素(FITC):為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,最大吸收光波長為490~495nm,最大發(fā)射光波長520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。其主要優(yōu)點是:①人眼對黃綠色較為敏感;②通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。
2.四乙基羅丹明(RB200):為橘紅色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮。性質(zhì)穩(wěn)定,可長期保存。最大吸收光波長為570nm,最大發(fā)射光波長為595~600nm,呈橘紅色熒光。
3.四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC):最大吸引光波長為550nm,最大發(fā)射光波長為620nm,呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,可配合用于雙重標(biāo)記或?qū)Ρ热旧?。其異硫氰基可與蛋醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理白質(zhì)結(jié)合,但熒光效率較低。
4.藻紅蛋白(R-RE):本品為無定形,褐紅色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性質(zhì)穩(wěn)定,可長期保存。最大吸引光波長為565nm,最大發(fā)射光波長為578nm,呈明亮的橙色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,故被廣泛用于對比染色或用于兩種不同顏色的熒光抗體的雙重染色。