免疫放射分析(IRMA)是從RIA基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的核素標(biāo)記免疫測(cè)定。其特點(diǎn)是用核素標(biāo)記的抗體直接與受檢抗原反應(yīng)并用固相免疫吸附劑作為B或F的分離手段。
1.基本原理:IRMA屬于非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng),是將放射性核素標(biāo)記抗體,用過(guò)量的標(biāo)記抗體(Ab*)與待測(cè)抗原反應(yīng)(反應(yīng)式為Ag+Ab*=Ag-Ab*+Ab*)。待充分反應(yīng)后,除去游離的標(biāo)記抗體,Ag-Ab*+Ab*結(jié)合物的放射性強(qiáng)度與待測(cè)抗原呈正比關(guān)系
2.IRMA與RIA的異同點(diǎn)見表。
表:IRMA與RIA的異同點(diǎn)
RIA | IRMA | |
標(biāo)記物質(zhì) | 核素標(biāo)記抗原 | 核素標(biāo)記抗體 |
反應(yīng)速度 | 較慢 | 較快 |
反應(yīng)模式 | 競(jìng)爭(zhēng)抑制 | 非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作濃度 | 針對(duì)多克隆抗體特異性較低 | 針對(duì)單克隆抗體特異性較強(qiáng) |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作濃度 | 2~3數(shù)量級(jí) | 3個(gè)數(shù)量級(jí)以上 |
分析誤差 | 加樣誤差嚴(yán)重影響結(jié)果 | 較小 |
其他 | 可測(cè)大分子量與小分子量的物質(zhì)醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理 | 只能測(cè)定在分子上具有2個(gè)以上抗原表位物質(zhì) |
標(biāo)記物 | 限量 | 過(guò)量 |
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