抗原抗體溶液在電解質(zhì)的存在下結(jié)合,形成絮狀沉淀物,這種絮狀沉淀受抗原和抗體比例的直接影響,因此產(chǎn)生最適比例的測(cè)定方法,常見(jiàn)有:
1.抗原稀釋法:抗原進(jìn)行一系列稀釋與恒定濃度抗血清反應(yīng)。
2.抗體稀釋法:抗體進(jìn)行一系列稀釋與恒定濃度抗原反應(yīng)。
3.為了保證抗原抗體在最適比例條件下進(jìn)行反應(yīng),達(dá)到最大沉淀反應(yīng)的效果,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理就必須對(duì)抗原和抗體最佳工作濃度做出選擇。將上述我們講過(guò)的抗原稀釋法和抗體稀釋法結(jié)合起來(lái)就是方陣滴定法,又稱(chēng)為棋盤(pán)格法。
從上表中可以看出,Ab用1:40稀釋時(shí),Ag則應(yīng)按1:320稀釋?zhuān)环粗?,Ag按1:160稀釋?zhuān)瑒tAb應(yīng)按1:20稀釋。
又如在進(jìn)行ELISA試驗(yàn)時(shí),反應(yīng)試劑多,其工作濃度不同對(duì)結(jié)果影響較大,因此必須對(duì)包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行最佳工作濃度的滴定和選擇,以達(dá)到最佳的測(cè)定條件,同樣需要采用方陣滴定法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)找出抗原和抗體最佳稀釋度。
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