摘 要:目的探討甘露聚糖結合凝集素(MBL)對脂多糖(LPS)刺激的不同分化和活化狀態(tài)THP1/CD14細胞產生TNF-α和IL-12的影響。
方法 用PMA和/或IFN-γ誘導不同分化和活化狀態(tài)的THP1/CD14細胞,以不同濃度人MBL預處理2 h后再用光滑型LPS刺激24h.收集培養(yǎng)上清,以ELISA從蛋白水平分析其TNF-α和IL-12 p40+p70的產生。收集細胞提取總RNA,以RT-PCR從轉錄水平評估TNF-α和IL-12的表達。
結果 ELISA檢測發(fā)現,LPS可刺激各組細胞分泌TNF-α和IL-12 p40+p70;IFN-γ活化的THP1/CD14細胞產生IL-12 p40+p70最高,PMA分化的THP1/CD14細胞最低;PMA分化+IFN-γ活化的THP1/CD14細胞分泌TNF-α最高,未用PMA或IFN-γ預刺激的THP1/CD14細胞最低。高濃度MBL(50~100 mg/L)可抑制LPS誘導細胞分泌TNF-α和IL-12 p40+ p70的作用,低濃度MBL(1~10 mg/L)則幾無影響。RT-PCR分析亦顯示,與相應只用LPS刺激的實驗組相比,高濃度MBL(50 mg/L)對不同實驗組LPS誘導的TNF-α、IL-12 p35和p40的mRNA表達均有不同程度的抑制作用。
結論 MBL可抑制LPS誘導的不同分化和活化狀態(tài)THP1/CD14細胞產生TNF-α和IL-12,THP1/CD14細胞可用做進一步剖析MBL在免疫應答與細胞因子網絡調控中的作用及其機理的模型。