1.高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)

　?。?）原理：在血液中加入亞硝酸鹽使紅細(xì)胞中的亞鐵血紅蛋白變成高鐵血紅蛋白，正常紅細(xì)胞的G-6-PD催化戊糖旁路使NADP（氧化型輔酶Ⅱ）變成NADPH（還原型輔酶Ⅱ），其脫的氫通過亞甲藍(lán)試劑的遞氫作用而使高鐵血紅蛋白（Fe³⁺）還原成亞鐵血紅蛋白（Fe²⁺），通過比色可觀察還原的多少。當(dāng)G-6-PD缺乏時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率下降。

　　參考值 正常人高鐵血紅蛋白還原率大于75%（臍帶血≥77%）。

　?。?）臨床意義：G-6-PD缺乏時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率下降。中間缺乏（雜合子）為31%～74%，嚴(yán)重缺乏（半合子或純合子）小于30%。

　　2.變性珠蛋白小體檢查

　　（1）原理：G-6-PD缺乏的病人血樣加入乙酰苯肼于37℃孵育2～4小時(shí)，用煌焦油藍(lán)染色觀察紅細(xì)胞中珠蛋白小體的生成情況，計(jì)算含5個(gè)及以上珠蛋白小體的紅細(xì)胞的百分率。

　　參考值 正常人含5個(gè)及以上珠蛋白小體的紅細(xì)胞一般小于30%。

　?。?）臨床意義：G-6-PD缺乏癥常高于45%，故可作為G-6-PD缺乏的篩檢試驗(yàn)。但還原型谷胱甘肽缺乏癥也增高；不穩(wěn)定血紅蛋白病含小體的細(xì)胞百分率為75%～84%，HbH病和化學(xué)物質(zhì)中毒時(shí)也增高。

　　3.G-6-PD測(cè)定：包括熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和G-6-PD活性檢測(cè)。

　?。?）原理：在G-6-PD和NADP+存在下，G-6-PD能使NADP⁺還原成NADPH，后者在紫外線照射下會(huì)發(fā)出熒光。NADPH的吸收峰在波長(zhǎng)340nm處，可通過單位時(shí)間生成的NADPH的量來(lái)測(cè)定G-6-PD活性。

　　參考值 正常人有很強(qiáng)熒光。正常人酶活性為（4.97±1.43）U／gHb。

　?。?）臨床意義：G-6-PD缺陷者熒光很弱或無(wú)熒光；雜合子或某些G-6-PD變異者則可能醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理有輕到中度熒光。G-6-PD缺乏者酶活性減少。

　　4.丙酮酸激酶測(cè)定：包括熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和PK活性檢測(cè)。

　?。?）原理：在二磷酸腺昔（ADP）存在的條件下丙酮酸激酶（PK）催化磷酸烯醇丙酮酸（PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸，在輔酶Ⅰ還原型（NADH）存在情況下，丙酮酸被LDH轉(zhuǎn)化為乳酸，若標(biāo)記醫(yī)學(xué)敎育網(wǎng)整理熒光于NADH上，此時(shí)有熒光的NADH變?yōu)闊o(wú)熒光的NAD。

　　參考值 正常熒光在20min內(nèi)消失。15.0±1.99IU／gHb（37℃）（ICSH推薦Blume法）

　?。?）臨床意義：PK嚴(yán)重缺乏者熒光60min不消失；PK中等缺乏者熒光25～60min消失。純合子PK值在正常活性到25%以下，雜合子為正常25%～50%。