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    醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NAE)和氟化鈉抑制試驗

    2009-07-21 18:06 來源:
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      (1)原理:血細(xì)胞內(nèi)的醋酸AS-D萘酚酯酶與重氮鹽偶聯(lián),形成不溶性藍(lán)色沉淀,定位于胞質(zhì)內(nèi)。氟化鈉抑制試驗是以相同方法制備2份基質(zhì)液,其中一份加入適量氯化鈉,另一份不加氟化鈉作對照。將已固定的2張相同標(biāo)本的涂片混入這2種不同基質(zhì)液中,分別作醋酸AS-D萘酚酯酶染色。屬于非特異性酯酶染色。用油鏡觀察計數(shù)100或200個被檢細(xì)胞,分別計算醫(yī)學(xué)敎^育^網(wǎng)收集整理出抑制前和抑制后的陽性率和陽性積分,按下述公式計算出抑制率。

      抑制率(%)=(抑制前陽性率或陽性積分-抑制后陽性率或陽性積分)/抑制前陽性率或陽性積分×100

      所謂抑制是指氟化鈉試驗的抑制率大于50%。

      (2)結(jié)果判斷:染色陽性結(jié)果為胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黑色顆粒沉淀:①(一)無顆粒沉淀,為0分。②(±)顆粒少量、稀疏,為0.5分。③(+)胞質(zhì)內(nèi)1/2區(qū)域出現(xiàn)顆粒沉淀,為l分。④(++)胞質(zhì)內(nèi)3/4區(qū)域出現(xiàn)顆粒沉淀,為2分。⑤(+++)胞質(zhì)內(nèi)布滿顆粒沉淀,為3分。⑥(++++)胞質(zhì)內(nèi)充滿濃密的顆粒沉淀,為4分。

      (3)正常血細(xì)胞的染色

      1)粒細(xì)胞系統(tǒng):原粒細(xì)胞為陰性反應(yīng)或陽性反應(yīng),自早幼粒細(xì)胞至成熟中性粒細(xì)胞均為陽性反應(yīng),一般為(+)~(++),此反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

      2)單核細(xì)胞系統(tǒng):原始單核細(xì)胞為陰性反應(yīng)或陽性反應(yīng),幼單核細(xì)胞和單核細(xì)胞均為陽性反應(yīng),一般為(++)~(+++),此反應(yīng)能被氟化鈉抑制。

      3)淋巴細(xì)胞:淋巴細(xì)胞呈弱陽性反應(yīng),此反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

      4)紅細(xì)胞系統(tǒng):早期幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),醫(yī)學(xué)敎^育^網(wǎng)收集整理隨細(xì)胞的成熟陽性反應(yīng)程度逐漸減弱,此反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

      5)巨核細(xì)胞和血小板:為陽性反應(yīng)。

      (4)臨床意義:幫助鑒別急性白血病的類型。急性粒細(xì)胞白血病時,白血病原始粒細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),此反應(yīng)不被氟化鈉抑制。急性單核細(xì)胞白血病時,白血病原始單核細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),幼單核細(xì)胞和單核細(xì)胞為陽性反應(yīng),此反應(yīng)被氯化鈉抑制。急性粒-單核細(xì)胞白血病時,部分白血病細(xì)胞的陽性反應(yīng)可被氟化鈉抑制,部分陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

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