現(xiàn)代分子生物學(xué)是研究生物大分子--核酸及其表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、遺傳、調(diào)控、相互關(guān)系和相互作用，從分子水平上探討生命現(xiàn)象的科學(xué)，其主要研究對(duì)象是核酸（DNA和RNA）和蛋白質(zhì)。自從1953年Watson和Crick發(fā)現(xiàn)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)以來，分子生物學(xué)在短短五十年時(shí)間里以超乎想象的速度飛速發(fā)展，滲透到醫(yī)學(xué)每一個(gè)領(lǐng)域?？梢院敛豢鋸埖恼f，如果沒有分子生物學(xué)的應(yīng)用，人類探索生命活動(dòng)的行為將會(huì)寸步難行。

　　將分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用到臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)，使疾病診斷深入到基因水平，稱為基因診斷?；蛟\斷技術(shù)主要包括核酸分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)、基因多態(tài)性分析技術(shù)、單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）分析技術(shù)、熒光原位雜交染色體分析（FISH）技術(shù)、波譜核型分析（SKY）技術(shù)、DNA測(cè)序技術(shù)、基因芯片技術(shù)以及蛋白質(zhì)組技術(shù)等，一些先進(jìn)的分離和檢測(cè)技術(shù)大大促進(jìn)了上述技術(shù)的完善和發(fā)展，如毛細(xì)管電泳技術(shù)（CE）、液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（LC/MS/MS）、變性高效液相色譜技術(shù)（DHPLC）、非熒光遺傳標(biāo)記分析技術(shù)等。基因診斷在感染性疾病、遺傳性疾病、腫瘤性疾病等的診斷中發(fā)揮越來越重要的作用。下面，我們就臨床檢驗(yàn)診斷中涉及的主要分子生物學(xué)技術(shù)作一簡要介紹。

　　1．核酸分子雜交技術(shù)

　　即基因探針技術(shù)。利用核酸的變性、復(fù)性和堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理，用已知的探針序列檢測(cè)樣本中是否含有與之配對(duì)的核苷酸序列的技術(shù)。是臨床應(yīng)用最早的，也是最基礎(chǔ)的分子生物學(xué)技術(shù)，是印跡雜交、基因芯片等技術(shù)的基礎(chǔ)。不少探針已經(jīng)商品化。

　　2．PCR技術(shù)

　　PCR技術(shù)是一種特異擴(kuò)增DNA的體外酶促反應(yīng)，可以短時(shí)間擴(kuò)增出兩段已知序列之間的DNA，用于診斷、鑒定、制備探針及基因工程產(chǎn)品開發(fā)等，是一項(xiàng)及其有效和實(shí)用的技術(shù)。由于PCR試驗(yàn)存在一定的假陽性和假陰性問題，導(dǎo)致PCR技術(shù)在我國臨床診斷中的應(yīng)用曾一度被叫停，近年來由于改進(jìn)的PCR技術(shù)如巢式PCR（nested PCR）、多重PCR(multiplex PCR) 、熒光PCR技術(shù)等在較大程度上增加了該技術(shù)的敏感性和特異性，加上衛(wèi)生部于 2002-01頒發(fā)了有關(guān)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)臨床應(yīng)用的法規(guī)性文件《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)試驗(yàn)室管理暫行辦法》(衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2002〕10號(hào) )，要求從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的技術(shù)人員必須經(jīng)過衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心或授權(quán)的省級(jí)培訓(xùn)機(jī)構(gòu)的上崗培訓(xùn)，持證上崗，使PCR技術(shù)在臨床檢驗(yàn)診斷中重新發(fā)揮其不可替代的作用，PCR已廣泛用于核酸的科學(xué)研究以及臨床疾病的診斷和治療監(jiān)測(cè)，尤其在感染性疾病診斷方面更有應(yīng)用價(jià)值。

　　3．基因多態(tài)性分析技術(shù)

　　在人群中，各個(gè)體基因的核苷酸序列會(huì)存在一定差異，稱為基因多態(tài)性?；蚨鄳B(tài)性位點(diǎn)普遍存在于人的基因組中，并按孟德爾遺傳方式遺傳。如果在某個(gè)家庭中，某一致病基因與特定的多態(tài)性片段緊密連鎖，就可以用這一多態(tài)性片段作為一種“遺傳標(biāo)記”來判斷家庭成員或胎兒是否攜帶有致病基因。目前認(rèn)為基因多態(tài)性是個(gè)體的“身份證”；有的雖然不表現(xiàn)疾病，但也許會(huì)影響對(duì)藥物的反應(yīng)和用藥效果。因此，基因多態(tài)性分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于群體遺傳學(xué)研究、疾病連鎖分析和關(guān)聯(lián)分析、疾病遺傳機(jī)制研究、腫瘤易感性研究、個(gè)性化用藥等諸多方面。遺傳學(xué)上把基因多態(tài)性片段稱為遺傳標(biāo)記。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理遺傳標(biāo)記分析經(jīng)歷第一代限制性酶切片段多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism, RFLP)、第二代微衛(wèi)星DNA(Microsatellite DNA)，現(xiàn)已發(fā)展到第三代單核苷酸多態(tài)性分析(single nucleotide polymorphism, SNP)。